山区型和田羊毛囊KIF2.9基因的克隆与生物信息学分析

• 作者: 张亮 李树伟 武振辉
• 来源期刊: 黑龙江畜牧兽医（上半月）
• 学科: 生物学
• 关键词: 山区型和田羊 毛囊 KIF2.9基因 角蛋白中间丝 基因克隆 生物信息学
• 年，卷（期）: 2020,（2）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 6-11,152
• 页数: 7页
• 分类号: Q785
• 语种: 中文
• DOI: 10.13881/j.cnki.hljxmsy.2019.03.0501

摘要

为了探究毛囊KIF2.9基因对半粗毛型地方品种绵羊羊毛品质和性状的影响,试验以山区型和田羊为试验动物,提取毛囊总RNA,反转录成cDNA,PCR扩增毛囊KIF2.9基因,并定向插入pMD18-T克隆载体中构建pMD18-T-KIF2.9克隆质粒,经双酶切、PCR鉴定及测序分析正确后,将山区型和田羊毛囊KIF2.9基因连接到原核表达载体pET-28a(+)中,构建毛囊KIF2.9基因的pET28a(+)-KIF2.9原核表达重组质粒,检测其正确性,并运用DNAMAN、ProtParam、ExPASy、MEGA5.0等软件对其核苷酸和氨基酸序列进行生物信息学分析.结果 表明:山区型和田羊毛囊KIF2.9基因编码序列大小为1 527 bp,编码509个氨基酸.与GenBank中美利奴羊比较,毛囊KIF2.9碱基序列有20处碱基发生突变,但仅造成第292位丙氨酸→缬氨酸,第414位谷氨酰胺→谷氨酸,第466位色氨酸→苏氨酸这3处氨基酸的变异.与美利奴羊毛囊KIF2.9基因的序列比对,其碱基同源性为98.69％,但氨基酸序列同源性高达99.41％.与美利奴羊毛囊KIF2.9基因蛋白结构比对,蛋白质一级结构中原子总数、分子质量、脂肪酸系数略高于美利奴,氨基酸数目、等电点、平均疏水性等无明显差异;蛋白质二级结构中α-螺旋、β-转角、无规则卷曲和延伸链所占比例没有明显差异;蛋白质三级结构中某些肽段结构发生了变化.KIF2.9基因分子系统进化树反映山区型和田羊与美利奴羊亲缘关系较近.说明山区型和田羊与美利奴羊的羊毛类型有差异,但毛囊KIF2.9基因在氨基酸水平上高度相似,亲缘关系较近.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李树伟		23	50	4.0	7.0
2	武振辉		1	0	0.0	0.0
3	张亮		1	0	0.0	0.0