表达HIV-1 CRF01_AE亚型结构基因小鼠模型的建立和鉴定

• 作者: 周玉柏 岳成 徐柯 郭婷婷
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 医学
• 关键词: HIV-1 CRF01_AE亚型 疫苗评价 免疫原性
• 年，卷（期）: 2020,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 257-261
• 页数: 5页
• 分类号: R392.1|Q78
• 字数: 3480字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2020.03.001

摘要

目的:构建并鉴定表达HIV-1 CRF01_AE亚型结构基因的小鼠模型.方法:使用哺乳动物密码子优化的HIV-1 CRF01_AE gp160基因,通过慢病毒包装系统构建重组慢病毒LV-GFP-AE gp160,将上述重组慢病毒感染小鼠肺上皮细胞TC-1,经嘌呤霉素抗性筛选获得稳定表达gp160基因的TC-1细胞.采用RT-PCR、流式细胞术检测gp160基因在细胞内的表达稳定性,将稳定表达Gp160蛋白的TC-1-HIV AE gp160细胞接种小鼠,用免疫组化方法检测小鼠体内细胞团块中HIV Gp160蛋白的表达.结果:菌落PCR、酶切鉴定和测序表明重组质粒pLVX-AE gp160构建正确,RT-PCR、GFP荧光及流式细胞术结果均显示gp160基因能在细胞TC-1中稳定表达,免疫组化结果也表明小鼠体内接种的细胞可以稳定表达HIV Gp160蛋白.结论:建立了稳定表达HIV-1 CRF01_AE亚型Gp160蛋白的TC-1细胞及小鼠模型,为HIV-1 CRF01_AE亚型HIV疫苗的临床前研究提供了可靠的体外、体内免疫原性评价工具,为该疫苗的进一步开发奠定了坚实的实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭婷婷	北京工业大学生命科学与生物工程学院	6	2	1.0	1.0
3	徐柯	中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所	10	14	2.0	2.0
4	周玉柏	北京工业大学生命科学与生物工程学院	18	22	3.0	3.0
5	岳成	北京工业大学生命科学与生物工程学院	2	0	0.0	0.0