钙调蛋白及其突变体与电压门控钠离子通道1.2异亮氨酸-谷氨酰胺基序的结合作用

• 作者: 刘君妍 宛昱君 成小雨 李昕宇 沙莎 王妤婷 胡德邻 贾婉莹 郭凤
• 来源期刊: 浙江大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 钙调蛋白 电压门控钠通道 DNA,环状/分析 氨基酸序列 突变 异亮氨酸 钙/代谢
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 原著
• 页码范围: 71-75
• 页数: 5页
• 分类号: R35
• 字数: 3494字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2020.02.06

摘要

目的:探讨在不同钙离子浓度下电压门控钠离子通道(NaV)1.2与钙调蛋白(CaM)的结合,并分析CaM的钙离子结合位点突变后与NaV1.2结合能力的变化.方法:应用PCR技术构建NaV1.2蛋白片段异亮氨酸谷胺酰胺(IQ)基序的cDNA,采用QIAGEN点突变技术构建CaM突变体(CaM12、CaM34、CaM1234),应用牵出(pull-down)试验技术检测有钙(100 nmol/L钙离子浓度)和无钙条件下NaV1.2 IQ与CaM及其突变体(CaM12、CaM34、CaM1234)的结合情况.结果:CaM与NaV1.2 IQ在无钙和有钙情况下均可互相结合,而单独重组谷胱甘肽-S-转移酶(GST)不具有与CaM结合的能力.无钙条件下CaM与NaV1.2 IQ的结合量大于有钙条件下两者的结合量(P<0.05);无钙条件下,CaM野生型与NaV1.2 IQ结合量大于CaM突变体与NaV1.2 IQ的结合量,其中CaM1234的结合能力在三个突变体中最弱(P<0.05).结论:CaM及其突变体对NaV1.2 IQ的结合具有钙离子依赖性,这一CaM调控NaV1.2新机制为离子通道疾病研究提供了一定依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沙莎		7	5	1.0	2.0
2	宛昱君		1	0	0.0	0.0
3	刘君妍	中国医科大学药学院药物毒理教研室	3	0	0.0	0.0
4	王妤婷	中国医科大学药学院药物毒理教研室	1	0	0.0	0.0
5	成小雨		1	0	0.0	0.0
6	贾婉莹	中国医科大学药学院药物毒理教研室	2	0	0.0	0.0
7	胡德邻		1	0	0.0	0.0
8	李昕宇		1	0	0.0	0.0