CRISPR/Cas9介导的荔枝霜疫霉基因组编辑系统的建立

• 作者: 习平根 司徒俊键 姜子德 孔广辉 江立群 邵毅
• 来源期刊: 菌物研究
• 学科: 生物学
• 关键词: 荔枝霜疫霉 基因编辑 CRISPR/Cas9 RXLR
• 年，卷（期）: 2020,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 181-188
• 页数: 8页
• 分类号: Q949.325
• 语种: 中文
• DOI: 10.13341/j.jfr.2020.1355

摘要

参考大豆疫霉的CRISPR/Cas9基因组编辑技术体系,针对荔枝霜疫霉RXLR效应蛋白编码基因PlAvh133设计了20 bp的sgRNA靶向序列,结合同源替换的方式对该基因进行敲除.利用聚乙二醇(PEG)介导的原生质体转化,共获得了58个具有G418抗性的转化子,通过PCR和测序分析证明其中5个转化子的PlAvh133基因被敲除,敲除效率约为8.6％.荧光定量PCR分析证实P1Avh133敲除突变体中该基因不表达.本研究结果为荔枝霜疫霉的基因功能研究提供了重要的技术基础.