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摘要:
来源于黏细菌Myxococcus sp.V11的海藻糖合酶(trehalose synthase,EC 2.4.1.245) TreS Ⅱ可通过转糖苷作用将麦芽糖转化成为海藻糖,在酶法生产海藻糖上显示出一定的应用潜力,但TreS Ⅱ对热敏感,在60℃保温3h,酶活性丧失,限制了其应用范围.目的:拟探索TreS Ⅱ影响热稳定性的氨基酸残基构成,通过对可能的氨基酸位点进行定点突变,以期获得耐热性的突变子,扩大TreS Ⅱ应用范围.方法:通过PCR介导的方法对TreS Ⅱ可能影响到热稳定性的氨基酸Q3、A283、W374、R449和Y537进行定点突变,以野生型重组酶为对照,比较突变型与野生型的最适反应温度和最适反应pH,通过测定不同温度下保存不同时间后的残留酶活,检测突变子的耐热效果.结果:研究表明突变子Q3D、A283R、W374D、R449Q和Y537H的比酶活与野生型无显著差异,且最适pH和最适反应温度也未发生改变;A283R、Y537H在60℃条件下,3h后活性剩余68%;Q3D、W374D、R449Q在温度60℃时,3h后活性剩余35%.结论:TreS Ⅱ分子结构中与金属离子结合的几个氨基酸残基的改变对蛋白质分子的耐热性具有显著影响.
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嗜热栖热菌
海藻糖合酶
分子改造
海藻糖
内容分析
关键词云
关键词热度
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文献信息
篇名 Myxococcus sp.V11海藻糖合酶TreS Ⅱ分子改造
来源期刊 中国生物工程杂志 学科 生物学
关键词 Myxococcus sp.V11 海藻糖合酶 定点突变 热稳定性
年,卷(期) 2020,(3) 所属期刊栏目 技术与方法
研究方向 页码范围 79-87
页数 9页 分类号 Q814
字数 语种 中文
DOI 10.13523/j.cb.1907049
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 王飞 江西农业大学生物科学与工程学院 39 281 9.0 15.0
3 吴晓玉 江西农业大学生物科学与工程学院 50 367 9.0 17.0
5 陈金印 5 8 2.0 2.0
6 赵晓艳 江西农业大学生物科学与工程学院 2 3 1.0 1.0
7 陈允妲 江西农业大学生物科学与工程学院 1 0 0.0 0.0
8 章雅倩 江西农业大学生物科学与工程学院 1 0 0.0 0.0
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研究主题发展历程
节点文献
Myxococcus sp.V11
海藻糖合酶
定点突变
热稳定性
研究起点
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引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国生物工程杂志
月刊
1671-8135
11-4816/Q
大16开
北京中关村北四环西路33号
82-13
1976
chi
出版文献量(篇)
4896
总下载数(次)
30
总被引数(次)
45351
相关基金
江西省自然科学基金
英文译名:Natural Science Foundation of Jiangxi Province
官方网址:http://www.jxstc.gov.cn/ReadNews.asp?NewsID=861
项目类型:
学科类型:
论文1v1指导