藏红花酸糖基转移酶UGTCs4基因的克隆、生物信息学及表达分析

• 作者: 刘忠山 李春平 王博 王玮 玛依拉·玉素音 石必显 赖成霞 高燕
• 来源期刊: 中草药
• 学科: 医学
• 关键词: 藏红花酸 糖基转移酶 克隆 表达分析 藏红花悬浮细胞
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 所属期刊栏目: 药材与资源
• 页码范围: 1044-1051
• 页数: 8页
• 分类号: R282.12
• 语种: 中文
• DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2020.04.031

摘要

目的 以藏红花悬浮细胞为研究对象,克隆藏红花酸糖基转移酶(crocetin glycosyltransferase)UGTCs4基因,并对其进行生物信息学和表达分析.方法 采用同源克隆法和5'RACE (rapid amplification of cDNA ends)技术克隆UGTCs4基因的全长cDNA序列.运用生物信息学方法对该基因进行分析,预测其编码蛋白的结构与功能,并通过半定量RT-PCR(semi-quantitative reverse transcription and polymerase Chain reaction)方法检测不同诱导物条件下的基因表达情况.结果 UGTCs4基因的cDNA全长为1 380 bp,编码459个氨基酸.分子进化树分析,该糖基转移酶基因与已知的藏红花酸糖基转移酶基因UGTCs2具有相同的糖基化藏红花酸的功能.RT-PCR的结果显示,UGTCs4基因能够响应吲哚乙酸(IAA)、脱落酸(ABA)、赤霉素(GA)、过氧化氢(H2O2)、茉莉酸甲酯(MeJA)多种处理,这些处理均能促使其进行转录.结论 首次从藏红花悬浮细胞中分离并报道了UGTCs4的cDNA克隆,并证实UGTCs4对不同诱导子的响应情况,为进一步研究藏红花素的生物合成及表达调控研究奠定了基础.