反转录巢式PCR检测FⅧ基因内含子22倒位

• 作者: 黄昆 吴润晖 甄英姿 李刚 吴心怡 李泽坤 陈振萍
• 来源期刊: 中国小儿血液与肿瘤杂志
• 关键词: 反转录巢氏PCR 长链PCR 内含子22倒位 血友病A
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 329-333
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-5323.2020.06.005

摘要

目的 建立凝血因子Ⅷ(FⅧ)基因内含子22倒位的反转录巢氏PCR检测技术,与长链PCR进行比较.方法 选取45例已在我院确诊为重型血友病A男性患者及3例血友病患者母亲,应用改良的反转录巢氏PCR检测和长链PCR方法检测患者是否存在内含子22倒位,对22倒位阴性患者进一步做内含子1倒位和二代基因测序验证.结果 长链PCR检测45例患者中,内含子22倒位阳性20例,阴性25例.反转录巢氏PCR结果与长链-PCR一致.两种方法检测均阴性患者经二代测序及内含子1倒位检测,证实均存在FⅧ基因非22倒位的突变,其中4例巢式PCR产物凝胶电泳未见扩增条带判读为阴性的样本,2例为大片段缺失,2例为无义突变.结论 反转录巢式PCR与长链-PCR对内含子22倒位的检测结果完全一致,有望作为一种快速准确的内含子22倒位检测方法在血友病基因诊断中予以应用.