非洲猪瘟病毒实时荧光LAMP检测方法的建立与应用

• 作者: 冯小宇 刘晓冬 吴迪 周德刚 宋彦军 张启龙 张玮 李蕊 杜鹃 栗云鹏 王培 王林 程汝佳 韦海涛 高晓龙
• 来源期刊: 中国兽药杂志
• 学科: 农学
• 关键词: 非洲猪瘟病毒 实时 荧光环介导等温扩增
• 年，卷（期）: 2020,（8）
• 所属期刊栏目: 非洲猪瘟防控
• 页码范围: 1-8
• 页数: 8页
• 分类号: S852.659.6
• 语种: 中文
• DOI: 10.11751/ISSN.1002-1280.2020.08.01

摘要

为建立一种快速简便、灵敏度高、准确性好的非洲猪瘟病毒恒温快速检测方法,根据ASFV P72基因保守区域设计特异性引物,优化引物浓度、反应温度、反应时间,建立了一种基于SYTO9荧光染料的非洲猪瘟病毒实时荧光LAMP快速检测方法.结果 表明,该方法在63℃条件下扩增40 min,该方法灵敏度高,最低可检测限为10 copies/μL;特异性良好,与猪伪狂犬病毒、猪瘟病毒、美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒、欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪流行性腹泻病毒无交叉反应;重复性好,变异系数低于5％.对70份临床样本检测,4份血液样品和9份脾脏样品检测阳性,与荧光定量PCR检测结果符合率为100％.该方法灵敏度高、特异性强、重复性好、符合率高,适用于非洲猪瘟现场快速诊断.