脂联素抑制β1-肾上腺素受体自身抗体诱导的大鼠H9c2心肌细胞自噬流下降

• 作者: 侯晓鸿 原媛 孙聪 宁娜 王丽 王昌图 王晓晖 郭帅
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 脂联素 β1-肾上腺素受体自身抗体 自噬 AMP活化蛋白激酶 心肌细胞
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 796-802
• 页数: 7页
• 分类号: R363.2|R329.2+5
• 字数: 5445字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2020.05.004

摘要

目的:观察脂联素抑制β1-肾上腺素受体(β1-AR)自身抗体(β1-AA)诱导的大鼠心肌细胞自噬流下降的作用及机制.方法:SD大鼠随机分为免疫组和对照(control)组,每组6只;H9c2大鼠心肌细胞分为control组、β1-AA组、β1-AA+脂联素组、脂联素组、β1-AA+脂联素+Compound C组和β1-AA+Compound C组.合成β1-AR细胞外第2环(β1-AR-ECII)抗原肽段,主动免疫SD大鼠并采用亲和层析法纯化大鼠血清中β1-AA;CCK-8法检测H9c2心肌细胞活力;real-time PCR检测心肌细胞LC3B和beclin-1的mRNA水平;Western blot检测心肌细胞LC3-II、P62、AMP活化蛋白激酶(AMPK)和磷酸化AMPK(p-AMPK)的蛋白水平.结果:与control组相比,10 μg/L脂联素预处理可显著抑制β1-AA诱导的心肌细胞活力下降(P＜0. 05);脂联素预处理可显著逆转β1-AA诱导的心肌细胞LC3B和beclin-1 mRNA水平下降、LC3-II蛋白表达水平下降及P62蛋白的累积(P＜0. 05);脂联素可逆转β1-AA诱导的心肌细胞AMPK磷酸化水平下降(P＜0. 05).加入AMPK抑制剂Compound C预处理,脂联素则不能逆转β1-AA诱导的心肌细胞LC3B和beclin-1 mRNA及LC3-II蛋白水平降低(P＜0. 05),但仍可减少P62蛋白累积(P＜0. 05).结论:脂联素抑制β1-AA诱导的H9c2大鼠心肌细胞自噬流降低,其机制部分依赖AMPK途径.