异硫氰酸苯乙酯经PI3K/Akt/mTOR途径抑制非小细胞肺癌细胞表达c-Myc和RPS19

• 作者: 徐丽丽 王柏琦 罗毅 胡军 谢勇 陈艳华 高文奎
• 来源期刊: 中国细胞生物学学报
• 关键词: 异硫氰酸苯乙酯 糖体蛋白S19 非小细胞肺癌 c-Myc
• 年，卷（期）: 2020,（10）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1774-1781
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.11844/cjcb.2020.10.0007

摘要

该研究旨在探讨异硫氰酸苯乙酯(PEITC)抑制人非小细胞肺癌细胞表达c-Myc和RPS19的分子机制.首先体外培养A549、H358和H1299细胞系,Western blot、qPCR检测细胞内核糖体蛋白S19(RPS19)和c-Myc的表达水平.10、30和50 μmol/L PEITC处理细胞后,Western blot检测细胞内RPS19、c-Myc、E-cadherin、Vimentin的表达水平以及PI3K/Akt、mTOR和S6K的磷酸化情况,并通过构建pGL4.10-RPS 19荧光报告基因载体检测RPS19启动子报告基因活性.随后采用c-Myc、PI3K/Akt以及nTOR抑制剂处理细胞,分析细胞内RPS19、c-Myc表达变化.随后细胞内转染pcDNA3-cMyc-HA质粒过表达c-Myc,观察其对细胞内RPS19表达的影响,并采用siRNA沉默RPS19表达,检测细胞内EMT相关分子E-cadherin、Vimentin表达以及细胞侵袭、迁移的变化.Westemblot以及qPCR结果显示,A549和H1299细胞系中RPS19和c-Myc的表达水平均显著高于MRC-5细胞.采用不同浓度PEITC处理细胞后,细胞内RPS19、c-Myc以及Vimentin表达水平显著降低,E-cadherin表达增高,PI3K/Akt、mTOR和S6K磷酸化水平减弱.PI3K/Ak、mTOR抑制剂均可显著降低细胞内RPS19和c-Myc表达.此外,c-Myc抑制剂也能够显著降低细胞内RPS19表达以及启动子报告基因活性.转染pcDNA3-cMyc-HA质粒后,细胞内RPS19水平显著增高,而沉默RPS19表达则可显著增强细胞内E-cadherin表达并抑制细胞的侵袭和迁移.PEITC能够抑制人非小细胞肺癌H1299细胞表达c-Myc和RPS19,其机制可能与抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路有关.