SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR在布鲁氏菌快速检测中的应用研究

• 作者: 张爱萍 马丽 谢辉 杨旭欣 薛红梅 赵志军 李积权 于守鸿 赵忠智 徐立青
• 来源期刊: 中国媒介生物学及控制杂志
• 学科: 医学
• 关键词: SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR 布鲁氏菌 快速检测
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 调查研究
• 页码范围: 695-698
• 页数: 4页
• 分类号: R184.3|R516.7
• 语种: 中文
• DOI: 10.11853/j.issn.1003.8280.2020.06.014

摘要

目的 将SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR技术应用于布鲁氏菌的快速检测,为布鲁氏菌病(布病)的早期发现提供新的检测手段.方法 将收集的布病急性期患者全血2份,慢性期患者全血8份和羊全血12份进行细菌分离培养,筛选疑似布鲁氏菌进行涂片镜检、噬菌体裂解试验,同时提取核酸,制备模板,利用SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR技术进行布鲁氏菌检测.结果 共分离出4株疑似布鲁氏菌,其形态及染色特征与革兰阴性小杆菌相同.1、2、3号菌株噬菌体裂解试验BK2裂解,Tb不裂解,确定为羊种布鲁氏菌,4号噬菌体裂解试验阴性.除4号待测菌株和阴性对照EV76外,其他菌株的荧光定量PCR的熔解曲线在88 ℃左右出现特异性的吸收峰,证实是布鲁氏菌.结论 SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR技术检测布鲁氏菌用时短,特异性强,重复性好,在布病的筛查和布鲁氏菌的快速检测中具有较好的推广应用价值.