非洲马瘟病毒可视化RT-LAMP现场检测方法的建立

• 作者: 李富祥 杨仕标 赵文华
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 非洲马瘟病毒 反转录环介等温扩增 可视化现场检测
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 诊断和检测技术
• 页码范围: 579-583
• 页数: 5页
• 分类号: S855.3
• 字数: 3706字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0589.201911021

摘要

为建立非洲马瘟病毒(AHSV)可视化RT-LAMP检测方法,本研究根据AHSV外衣壳蛋白(VP7)基因保守序列设计2对特异性引物,通过反应条件优化建立了AHSV可视化RT-LAMP检测方法.结果显示,本实验所建立RT-LAMP方法的最佳反应条件为62℃1 h;利用该方法检测进口灭活冻干疫苗中的9个血清型AHSV以及马流感病毒、马传贫病毒、马动脉炎病毒和蓝舌病病毒的RNA,结果显示所有血清型AHSV RNA检测均为阳性,其它病毒RNA检测为阴性,该方法特异性较强;该方法最低可检测到3.2×10-9 ng/μL的RNA,敏感性是普通RT-PCR方法的1000倍.利用建立的RT-LAMP方法和普通RT-PCR方法对35份马血和5份驴血样品同时进行检测,结果显示二者阳性和阴性符合率均为100％.本研究在国内外首次建立了AHSV 9种血清型的可视化RT-LAMP检测方法,其具有特异性强、敏感性高、快速和高通量检测的优点,为非洲马瘟(AHS)快速的可视化现场诊断提供可行方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨仕标	云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室	36	92	5.0	7.0
2	李富祥	云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室	39	106	7.0	7.0
3	赵文华	云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室	26	63	4.0	6.0