仙台病毒RT-LAMP可视化检测方法的建立

• 作者: 倪丽菊 周洁 赵丽娟 陈洪岩 陶凌云 高诚
• 来源期刊: 中国实验动物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 仙台病毒 RT-LAMP 实时监控 快速检测
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 专题研究
• 页码范围: 293-298
• 页数: 6页
• 分类号: Q95-33
• 字数: 4869字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4847.2016.03.015

摘要

目的：建立一种快捷、灵敏的检测方法，即反转录-环介导等温扩增方（ RT-LAMP）用于仙台病毒（SeV）的检测。方法根据GenBank 公布的SeV序列（DQ219803.1），在其保守区域设计了六套LAMP引物，利用LAMP Real-Time Turbidimeter LA-320C仪监测反应进程并筛选最佳引物、反应条件，建立对SeV核酸进行特异性扩增的RT-LAMP 检测方法，并可通过加入目测荧光检测试剂肉眼判断结果。对所建立的方法进行了敏感性、特异性评估并对92份样品进行了检测。结果该方法在63℃恒温下作用60 min，SeV RNA获得了高效率的特异性扩增，与其余常见小鼠病毒无交叉反应；最低检出量为2.1TCID50 SeV，比RT-PCR方法高102倍；肉眼判断结果与Real-Time Turbidimeter LA-320仪监测结果一致；通过对92份样品的RT-LAMP，RT-PCR和间接ELISA方法的检测比对，三者符合率为100％。结论建立的SV RT-LAMP 检测方法具有快速、特异、灵敏，操作简单的特点，具有良好的应用前景。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高诚		61	229	7.0	12.0
2	陈洪岩	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所实验动物中心	47	241	8.0	14.0
3	周洁		19	51	5.0	6.0
4	陶凌云		14	15	2.0	3.0
5	倪丽菊		8	10	2.0	3.0
6	赵丽娟		4	8	1.0	2.0