GGTA1、GGTA1/β4GalNT2不同基因型敲除猪免疫原性检测

• 作者: 刘春晨 杜敏杰 潘登科 邢向阳 鲁琳
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 免疫原性 GGTA1 β4GalNT2 巴马小型猪
• 年，卷（期）: 2020,（9）
• 所属期刊栏目: 研究论文与报告
• 页码范围: 1587-1594
• 页数: 8页
• 分类号: S828.9
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2020.09.007

摘要

免疫排斥反应是限制异种器官移植的主要因素,本研究以获得α-1,3-半乳糖基转移酶基因(α-1,3-galactosyltransferase,GGTA1)敲除的巴马小型猪(Sus scrofa)和GGTA1、β1,4 N-乙酰半乳糖胺转移酶(β1,4 N-acetylgalactosaminyl transferase,β4GalNT2)双基因敲除的巴马小型猪为基础,筛选低免疫原性群体.通过分离获得的不同基因型猪外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)与过异硫氰酸荧光素标记的植物凝集素(fluorescein isothiocyanate-griffonia simplicifolia isolectin B4,FITC-GSIB4)和双花扁豆凝集素(fluorescein isothiocyanate conjugated Dolichos bliflorus agglutinin,FITC-DBA)共孵育,检测GGTA1基因和β4GalNT2基因的表达情况;检测血液生理、生化指标,评估GGTA1/β4GalNT2双基因敲除对巴马小型猪健康的影响;检测不同基因修饰猪的混合PBMC与ABO血型系统的人(Homo saplens)血清孵育后IgG结合量,分析理想受体血型;检测不同基因修饰猪的PBMC与AB血型人血清孵育后IgG结合量,筛选低免疫原性供体基因型.GSIB4和DBA孵育结果显示GGTA1/β4GalNT2基因敲除猪细胞表面不表达相应抗原;生理生化检测结果显示,与野生型(wide type,WT)巴马猪相比,GGTA1-/-和GGTA1-/-/β-4GalNT2+/-基因修饰猪各项指标没有显著差异,GGTA1-/-/β4GalNT2-/-基因修饰猪中性粒细胞数显著减少,肌酸激酶和肌酐显著升高;不同血型血清孵育结果显示,与A型、B型和O型血IgG结合量相比,AB型血IgG结合量最低,为理想受体血型;不同基因型敲除猪血清孵育结果显示,与WT巴马猪和GGTA1-/-基因敲除猪相比,GGTA1/β4GalNT2双基因敲除猪IgG结合量下降,免疫原性降低.GGTA1/β4GalNT2基因敲除巴马小型猪免疫原性进一步降低,与AB血型人血清产生的免疫排斥反应最低.本研究为未来异种器官移植临床试验提供了免疫排斥相关数据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	鲁琳		39	431	11.0	19.0
2	刘春晨		1	0	0.0	0.0
3	杜敏杰		1	0	0.0	0.0
4	邢向阳		1	0	0.0	0.0
5	潘登科		1	0	0.0	0.0