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摘要:
目的 半乳糖-α1,3-半乳糖(αGal)表位是猪到人异种移植中引起排斥反应的主要异种抗原.通过同源重组敲除猪α1,3-半乳糖基转移酶基因可从异种移植物表面彻底清除αGal表位.本研究的目的 在于利用正负筛选打靶载体定向缺失猪GGTA1基因.方法 构建猪α1,3-半乳糖基转移酶基因正负筛选打靶载体pSL/GT,载体包含了正负筛选标记基因neo和tk,打靶载体线性化后用脂质体包裹转染猪肾细胞系PK-15细胞,利用G418和GANC进行抗性细胞克隆的药物筛选,挑选抗性克隆进行PCR及Southern杂交鉴定.结果 共得到436个抗性细胞克隆,其中31个克隆PCR结果阳性.经Southern杂交鉴定证实,其中1个克隆发生了同源重组,为杂合子.结论 本研究构建了有效的猪GGTA1基因的正负筛选打靶载体pSL/GT,并利用其在猪肾细胞系PK-15细胞中定向缺失GGTA1基因,获得了杂合子GGTA1(+/-)PK-15细胞.
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文献信息
篇名 利用正负筛选打靶载体在猪肾细胞系PK-15细胞中敲除GGTA1基因
来源期刊 军事医学科学院院刊 学科 生物学
关键词 α-Gal表位 α1,3-半乳糖基转移酶 基因打靶 异种移植
年,卷(期) 2010,(3) 所属期刊栏目
研究方向 页码范围 234-238
页数 分类号 Q813
字数 5247字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1674-9960.2010.03.009
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 章扬培 军事医学科学院野战输血研究所 98 679 13.0 20.0
2 常宏宇 第二炮兵总医院儿科 6 30 3.0 5.0
6 宫锋 军事医学科学院野战输血研究所 47 194 7.0 11.0
7 季守平 军事医学科学院野战输血研究所 41 231 8.0 13.0
8 鲍国强 军事医学科学院野战输血研究所 23 89 5.0 8.0
9 李素波 军事医学科学院野战输血研究所 54 223 7.0 11.0
10 李芳 第二炮兵总医院儿科 11 74 6.0 8.0
11 聂亚玲 第二炮兵总医院儿科 6 24 2.0 4.0
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研究主题发展历程
节点文献
α-Gal表位
α1,3-半乳糖基转移酶
基因打靶
异种移植
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
军事医学
月刊
1674-9960
11-5950/R
大16开
北京太平路27号
82-757
1956
chi
出版文献量(篇)
4313
总下载数(次)
13
总被引数(次)
15987
相关基金
国家重点基础研究发展计划(973计划)
英文译名:National Basic Research Program of China
官方网址:http://www.973.gov.cn/
项目类型:
学科类型:农业
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