苹果酰基辅酶A结合蛋白4基因MpACBP4的克隆及功能鉴定

• 作者: 文媛媛 韩丽娜 马宗桓 张亚云 余慧芳 毛娟 左存武 陈佰鸿
• 来源期刊: 植物生理学报
• 关键词: 苹果 MpACBP4 转基因Micro-Tom番茄 干旱胁迫
• 年，卷（期）: 2020,（11）
• 所属期刊栏目: 研究报告|Original Papers
• 页码范围: 2397-2407
• 页数: 11页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13592/j.cnki.ppj.2020.0201

摘要

为明确苹果(Maluspumila)MpACBP4基因在非生物胁迫中的功能,本研究从苹果砧木M26中克隆得到 MpACBP4基因(GenBankNo.MG878871.1).该基因长度为2 016 bp,编码671个氨基酸,等电点为5.37.MpACBP4是非分泌蛋白,无信号肽,具有4个保守功能结构域,5个KELCH β折叠结构基序.将MpACBP4与其他9种植物中ACBP4蛋白的氨基酸序列进行比对,发现总体相似度达到81％以上,说明MpACBP4是高度保守的蛋白质.进化关系显示,MpACBP4蛋白与梨(Pyrus)的亲缘关系最近.qRT-PCR结果显示,MpACBP4基因在不同干旱(轻度、中度、重度)胁迫下均有响应.为进一步鉴定其功能,构建了MpACBP4基因的过表达载体,并通过农杆菌介导遗传转化法获得转基因Micro-Tom番茄,进行聚乙二醇6000(PEG6000)胁迫处理.试验结果显示:转基因植株种子的萌芽率是野生型的56％,过氧化氢酶(CAT)活性是野生型的58％,相对电导率是野生型的1.3倍左右.以上结果说明苹果MpACBP4基因可能参与逆境胁迫响应.