Fsp27基因沉默载体的构建及其对细胞脂解的影响研究

• 作者: 冯晨毅 刘田福 张少华 燕炯 董维鹏 许祥
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 脂肪特异性蛋白27 RNA干扰 3T3-L1前脂肪细胞 脂解
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 88-94
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2019-0369

摘要

构建脂肪特异性蛋白27(Fat-specific protein of 27,Fsp27)基因沉默载体,研究沉默Fsp27基因表达对3T3-L1细胞脂解的影响,并对其作用机制进行探究.采用RNAi技术,构建Fsp27基因真核干扰载体,下调Fsp27基因的表达."鸡尾酒"法诱导3T3-L1前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞.脂质体转染脂肪细胞,油红O染色脂滴,酶法测定细胞中甘油及甘油三酯的含量.Western blot法检测细胞中Fsp27、HSL、ATGL和PPARγ 的蛋白表达.Western blot结果显示:阳性sh-Fsp27干扰载体均能有效下调Fsp27的表达,且伴随细胞内ATGL和PPARγ 的表达量升高(P<0.05),其中sh-Fsp27-2的沉默效果最好;酶学方法检测结果显示:阳性sh-Fsp27干扰组细胞中甘油三酯含量下降,甘油含量升高(P<0.05);油红O染色结果发现:空白对照组与阴性对照组均有大脂滴堆积,阳性sh-Fsp27组小脂滴分布广泛,未见明显的大脂滴.sh-Fsp27-2组基因沉默载体的沉默效果最好,Fsp27基因沉默可以加快3T3-L1细胞的脂解速率,其主要是通过抑制脂滴融合和增强ATGL酶的水解来完成对脂解的调控.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘田福	山西医科大学动物实验中心	76	395	9.0	16.0
2	燕炯	山西医科大学公共卫生学院	41	199	9.0	13.0
3	张少华	山西医科大学公共卫生学院	11	23	2.0	4.0
4	董维鹏	山西医科大学公共卫生学院	8	10	2.0	2.0
5	许祥	山西医科大学公共卫生学院	4	4	2.0	2.0
6	冯晨毅	山西医科大学公共卫生学院	3	2	1.0	1.0