蓝花丹ISSR-PCR反应体系的建立与优化

• 作者: 刘瑛琦 申萍 石丽莎 胡菊 蒋雨兰 陈曦 高素萍
• 来源期刊: 分子植物育种
• 关键词: 蓝花丹(Plumbago auriculata) ISSR-PCR 反应体系 正交试验 单因素试验
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 标记辅助育种
• 页码范围: 1909-1915
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13271/j.mpb.018.001909

摘要

为建立适合蓝花丹的ISSR-PCR反应体系,本研究以蓝花丹为供试材料,结合L16(45)正交试验和单因素试验设计对影响蓝花丹ISSR-PCR反应体系的5个因素(dNTPs,Mg2+,模板,Taq,引物)进行优化,并在最优反应体系的基础之上进行了引物及其最佳退火温度的筛选.结果 表明,5个影响因素中,Mg2+对扩增反应的影响最大;不同退火温度对扩增效果具有显著的影响,但将退火温度设置为55℃时,大部分的引物都能扩增出清晰的条带.最终建立的蓝花丹ISSR-PCR反应体系为:总体积25μL,其中含Taq酶1U,模板DNA 100 ng,dNTPs 0.15 mmol/L,引物0.4 μmol/L,Mg2+ 0.5 mmol/L,10×Buffer 2 μL.研究结果为蓝花丹及其近缘种的遗传多样性研究以及遗传图谱的构建提供分子标记水平上的依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高素萍		53	532	12.0	21.0
2	陈曦		5	29	3.0	5.0
3	申萍		1	0	0.0	0.0
4	石丽莎		1	0	0.0	0.0
5	胡菊		4	14	2.0	3.0
6	刘瑛琦		1	0	0.0	0.0
7	蒋雨兰		2	5	1.0	2.0