台兰ISSR-PCR反应体系的建立与优化

• 作者: 孙小琴 杨柏 王云艳 王朝雯 肖春宏
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 台兰(Cymbidium floribundum var.pumilum) ISSR分子标记 ISSR-PCR反应体系
• 年，卷（期）: 2014,（15）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 4583-4586,4590
• 页数: 5页
• 分类号: S682.1
• 字数: 3988字
• 语种: 中文

摘要

[目的]建立台兰稳定可靠的ISSR-PCR分子标记反应体系.[方法]用改良的CTAB法提取叶片的基因组DNA,并对影响台兰ISSR-PCR反应体系的主要成分进行筛选和优化.[结果]台兰的ISSR-PCR优化反应体系为:25μl PCR反应体积中,2.5μl10×PCRbuffer,2.0mmol/L MgCl2,100 ng模板DNA,0.5 mmol/L dNTPs,0.22 U Taq DNA聚合酶,0.4 μmoL/L引物,15.78μl双蒸水.最佳扩增程序为:94℃预变性5min,然后进行40个循环:94℃变性30s,复性温度根据各引物的TM值略低1～2℃,30s,72℃延伸50s,循环结束后72℃延伸7 min.[结论]台兰ISSR-PCR优化反应体系为今后利用ISSR技术进行台兰种质资源的遗传多样性分析奠定了技术基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	肖春宏	临沧师范高等专科学校数理系	19	56	4.0	6.0
2	王朝雯	临沧师范高等专科学校数理系	15	20	3.0	4.0
6	王云艳	南昌大学生命科学与食品工程学院	1	1	1.0	1.0
7	孙小琴	南昌大学生命科学与食品工程学院	6	34	4.0	5.0
8	杨柏	南昌大学生命科学与食品工程学院	1	1	1.0	1.0