多房棘球绦虫葡萄糖转运蛋白1重组抗原肽构建及原核表达方法建立

• 作者: 华国勇 郭建琴 李旻 张晓岩 汤锋 李润乐
• 来源期刊: 中国高原医学与生物学杂志
• 关键词: 多房棘球绦虫 葡萄糖转运蛋白1 跨膜蛋白 表位肽 原核表达
• 年，卷（期）: 2021,（2）
• 所属期刊栏目: 高原包虫病学研究
• 页码范围: 113-119
• 页数: 7页
• 分类号: Q815
• 语种: 中文
• DOI: 10.13452/j.cnki.jqmc.2021.02.007

摘要

目的 设计构建及表达纯化多房棘球绦虫葡萄糖转运蛋白1重组抗原肽(GLEP),为后续疫苗研究寻找有效工具.方法 用生物信息学软件预测EmGLUT1跨膜结构,将设计构建的表达载体pC zn1-GLEP转化入大肠杆菌真核表达系统,经IPTG诱导、Ni-NTA纯化获得目的 蛋白.结果 生物信息学软件分析结果表明EmGLUT1为12次跨膜蛋白,用柔性序列GS和KK将筛选后的肽段进行串联,构建重组表达载体pCzn1-GLEP,测序及酶切验证成功后,转化入Artic ex-press大肠杆菌表达系统(表达部位鉴定属于可溶性表达),经Ni-NTA亲和柱层析纯化后获得电泳纯级的GLEP蛋白.结论 成功构建GLEP的原核表达系统,并得到纯化重组蛋白,为后续疫苗研究提供有效工具.