miR-383靶向Notch1对结肠癌HCT116细胞增殖和迁移的影响

• 作者: 王晓元 赵轶峰 杨永江 黄迪 苏卓彬 李坤 李晶晶 李曙光
• 来源期刊: 国际消化病杂志
• 关键词: 结肠癌 miR-383 Notch1
• 年，卷（期）: 2021,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 38-44
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-534X.2021.01.010

摘要

目的 分析miR-383和Notch1在结肠癌中的作用及机制.方法 选择2017年4月至2020年3月在河北北方学院附属第一医院经病理检查确诊为结肠癌的74例患者,收集其经手术切除的肿瘤组织及癌旁正常组织(距肿瘤边缘>3 cm).采用TargetScan预测miR-383的潜在靶基因,采用双荧光素酶报告基因实验、逆转录定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白质印迹法(Western Blot)验证这一预测.采用免疫组织化学法、Western Blot和qRT-PCR检测Notch1在结肠癌组织和癌旁正常组织中的表达水平.分别在结肠癌HCT116细胞中转染阴性对照(NC)、miR-383模拟物、Notch1及共转染miR-383模拟物+Notch1,对应分为miR-NC组、miR-383组、Notch1组及miR-383+Notch1组;另设一组空白对照组.采用CCK8法和Tranwell实验检测miR-383模拟物和Notch1对结肠癌细胞增殖和迁移能力的影响.构建结肠癌裸鼠移植瘤模型,将裸鼠随机分为miR-NC模型组(n=3)和miR-383模型组(n=3),观察miR-383模拟物对裸鼠肿瘤生长的影响.结果 双荧光素酶报告基因实验结果显示,miR-383组的Notch1野生型质粒荧光素酶活性较miR-NC组明显降低(20.07±0.12比13.61±0.19,P<0.01).与miR-NC组相比,miR-383组中Notch1 mRNA和蛋白表达均明显降低(P均<0.01).结肠癌组织中的Notch1 mRNA和蛋白表达水平均明显高于癌旁正常组织(P均<0.01).细胞实验显示,与miR-NC组相比,Notch1组细胞的增殖、迁移能力明显升高,miR-383组细胞的增殖、迁移能力降低;miR-383+Notch1组的细胞增殖、迁移能力较miR-383组明显升高.在结肠癌移植瘤裸鼠模型中,miR-383模型组肿瘤组织中Ki67和Notch1蛋白表达水平均明显低于miR-NC模型组.结论 Notch1具有促进结肠癌细胞增殖和迁移的作用,而miR-383能靶向调控Notch1以抑制结肠癌细胞的生物学行为并减缓裸鼠肿瘤的生长.miR-383具有抑制结肠癌的作用.