miR-1290与RASAL2基因靶向关系的探索

• 作者: 谭芳 胡娟 李擎 杨晓燕 雷小勇
• 来源期刊: 中南医学科学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: RASAL2 3′-非翻译区 双荧光素酶报告基因 miR-1290
• 年，卷（期）: 2021,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 46-50
• 页数: 5页
• 分类号: R730
• 语种: 中文
• DOI: 10.15972/j.cnki.43-1509/r.2021.01.009

摘要

目的 通过构建RASAL2 3'-非翻译区(3'-UTR) 双荧光素酶报告载体,探索RASAL2 与非编码核糖核酸(ncRNA)miR-1290 的靶向调控情况.方法 借助在线数据库Targetscan 预测miR-1290与RASAL2 结合位点;利用聚合酶链反应( PCR) 技术扩增RASAL2 基因3'-UTR 序列,并以GV272 为载体将其连接,分别构建野生型GV272-RASAL2-wt 3'-UTR 和突变型GV272-RASAL2-mut 3'-UTR 荧光素酶报告基因重组质粒;并将miR-1290 及相应阴性对照分别与这两种重组质粒共转染到293T 细胞中,通过检测各组荧光素酶活性,探索miR-1290 与RASAL2 基因的结合情况?结果 酶切和测序数据表明:野生型GV272-RASAL2-wt 3'-UTR 及突变型GV272-RASAL2-mut 3'-UTR 双荧光素酶报告载体构建成功;相较于miR-1290 与突变型GV272-RASAL2-mut 3'-UTR共转染组,miR-1290 与野生型GV272-RASAL2-wt 3'-UTR 共转染组的荧光素酶活性无明显变化(P>0. 05)?结论 成功构建了RASAL2 3'-UTR 的双荧光素酶报告基因载体,但miR-1290 不能与RASAL2 结合,不能抑制其表达?