适用于转录组测序的大麦胚芽鞘保卫细胞分离方法优化

• 作者: 张子轩 郭融融 次而甲玛 王宏鹏 王俊斌 曹高燚 包曙光 谢晓东 陈小强
• 来源期刊: 麦类作物学报
• 关键词: 大麦 胚芽鞘 保卫细胞 酶解
• 年，卷（期）: 2021,（4）
• 所属期刊栏目: 遗传育种|Genetics & Breeding
• 页码范围: 410-416
• 页数: 7页
• 分类号: S512.1|S330
• 语种: 中文
• DOI: 10.7606/j.issn.1009-1041.2021.04.03

摘要

为获取高质量的大麦幼苗胚芽鞘保卫细胞以进行转录组相关研究,以大麦品种Morex的幼苗胚芽鞘为实验材料,分别对胚芽鞘表皮条撕取方法和保卫细胞分离方法进行优化.结果表明,通过"刮压"技术,不仅可以获得完整的大麦胚芽鞘表皮条,而且缩短了获取的时间;利用纤维素酶R-10与离析酶R-10制备酶解液,同时在酶解液中加入转录抑制剂,并结合表皮条"穿孔"进行辅助酶解,发现酶解温度为30℃、酶解时间为水浴1.5 h时,可以获取大量具有活性的大麦胚芽鞘保卫细胞.