GRP78基因短发夹RNA表达载体的构建和鉴定

• 作者: 刘慧晴 李玄 孟星圻 王璇 赵宗惠 贺修胜 李素云
• 来源期刊: 中南医学科学杂志
• 关键词: 胃癌 葡萄糖调节蛋白78 短发夹RNA 载体
• 年，卷（期）: 2021,（2）
• 所属期刊栏目: 基础医学|BASIC MEDICNE
• 页码范围: 158-161
• 页数: 4页
• 分类号: R735.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.15972/j.cnki.43-1509/r.2021.02.008

摘要

目的 构建葡萄糖调节蛋白78(GRP78)基因短发夹RNA表达载体并鉴定,为探讨GRP78对胃癌发生发展作用及机制提供前期基础.方法 运用核糖核酸(RNA)干扰技术构建靶向干扰GRP78蛋白短发夹RNA(GRP78-shRNA)载体,载体经转化、抽提及测序,用脂质体将GRP78-shRNA载体瞬时转染至SGC-7901胃癌细胞中,应用荧光显微镜、反转录定量PCR(qRT-PCR)及免疫印迹(Western blot)观察GRP78表达情况.结果 GRP78-shRNA载体测序显示序列正确;转染GRP78-shRNA载体的SGC-7901胃癌细胞可见绿色荧光;qRT-PCR和Western blot结果显示,转染GRP78-shRNA载体的SGC-7901胃癌细胞中GRP78基因和蛋白表达降低.结论 成功构建并鉴定GRP78基因短发夹RNA表达载体.