grp78真核表达载体构建及其稳定转染HeLa细胞系建立

• 作者: 吴章颖 廖书杰 李伟 杨润峰 王世宣 王恬 陶涛
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人grp78基因 载体构建 转染 基因表达
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 309-312
• 分类号: R34
• 字数: 3528字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2011.04.006

摘要

目的 构建人grp78基因真核表达载体,并建立稳定高表达grp78的人宫颈癌HeLa细胞系.方法 用RT-PCR方法从人宫颈癌HeLa细胞中扩增grp78基因编码区,将PCR产物克隆到pcDNA3.1(+)真核表达载体,构建重组质粒pcDNA3.1(+)/grp78并测序鉴定.用构建成功的pcDNA3.1(+)/grp78真核表达载体转染入人宫颈癌HeLa细胞,经G418筛选获得grp78稳定高表达的HeLa细胞系,并用RT-PCR及Western 印迹方法鉴定.结果 成功构建pcDNA3.1(+)/grp78真核表达载体,筛选获得稳定高表达人grp78的HeLa细胞系.结论 grp78真核表达载体的成功构建和稳定高表达grp78的HeLa细胞系的建立为进一步研究grp78的功能奠定了基础.