DC-SIGN真核表达载体的构建及其稳定转染HeLa细胞系的建立

• 作者: 丁铲 仇旭升 周恩民 孙英杰 宋翠萍 廖瑛 徐乐乐 王欣 王琰 茅翔 詹媛 谭磊 陆凤
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 树突状细胞特异性粘附分子-3-结合非整合素分子 新城疫病毒 树突状细胞 HeLa细胞
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 病毒
• 页码范围: 12-16
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.5
• 字数: 3235字
• 语种: 中文

摘要

为研究新城疫病毒(Newcastle disease virus, NDV)与树突状细胞特异性粘附分子-3-结合非整合素分子(dendritic cell specifi c intercellular adhesion molecule-3-grabbing non-integrin,DC-SIGN)的相互作用对NDV感染树突状细胞(dendritic cell,DC)的影响,本研究拟构建能够稳定表达DC-SIGN蛋白的细胞系,为研究DC-SIGN蛋白与病毒蛋白互作提供基础.以小鼠DCs提取的cDNA为模板,通过PCR方法获得DC-SIGN基因,连入真核表达载体,并命名为pcDNA-DC-SIGN,利用LipofectamineTM2000转染HeLa细胞,G418进行药物压力筛选,经RT-PCR和Western blot鉴定,获得了一株可以高效表达DC-SIGN蛋白的HeLa细胞,且经过多次传代后仍然可以稳定表达DC-SIGN,说明该细胞系构建成功.