HCCR-2干扰真核表达载体的构建及其稳定转染细胞系的建立

• 作者: 房殿春 杨仕明 汤旭东 熊震 罗元辉 郭军
• 来源期刊: 实用临床医药杂志
• 学科: 医学
• 关键词: HCCR-2 RNA干扰 稳定转染
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 肿瘤免疫治疗专题
• 页码范围: 27-30
• 页数: 4页
• 分类号: R394.18
• 字数: 2807字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-2353.2008.01.005

摘要

目的 构建HCCR-2于扰真核表达载体,获得干扰质粒稳定转染的HepG2细胞系.方法 人工合成HCCR-2基因干扰序列并定向插入到RNAi真核表达载体PGenesil-l,通过测序鉴定.将干扰质粒用脂质体法转染HeoG2细胞,经G418持续压力选择和有限稀释法获得稳定转染的细胞系.RT-PCR检测筛选克隆HCCR-2 mRNA的表达水平.结果 测序表明HCCR-2干扰序列及读框完全正确,干扰质粒稳定转染的HepG2细胞系在倒置荧光显微镜下呈绿色荧光.RT-PCR结果显示RNAi-H1、RNAi-H3序列对HCCR-2 mRNA有较好的抑制效果.结论 成功构建了HCCR-2干扰真核表达载体,HCCR-2干扰质粒稳定转染的HepG2细胞系的建立为进一步研究HCCR-2在肝癌细胞中的作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	房殿春	第三军医大学西南医院全军消化病研究所	349	2116	20.0	30.0
2	杨仕明	第三军医大学西南医院全军消化病研究所	97	741	14.0	20.0
3	罗元辉	第三军医大学西南医院全军消化病研究所	80	745	14.0	23.0
4	熊震	第三军医大学西南医院全军消化病研究所	4	15	2.0	3.0
5	郭军	第三军医大学西南医院全军消化病研究所	4	17	3.0	4.0
6	汤旭东	第三军医大学西南医院全军消化病研究所	11	76	6.0	8.0