Smyd1干扰真核表达质粒及其稳定转染H9c2细胞系的构建

• 作者: 刘华友 刘宪楚 刘明 吴秀山 廖四芳 李帆 李永青 鲁建鑫
• 来源期刊: 激光生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: Smyd1基因 RNAi技术 siRNA:H9c2细胞系 稳定转染
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 657-661
• 分类号: Q78
• 字数: 3882字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7146.2011.05.016

摘要

运用RNA干扰技术(RNA interference RNAi)构建pSUPER.retro-Smyd1真核表达质粒,经鉴定后用脂质体法转染H9c2细胞,通过G418筛选出稳定表达pSUPER.retro-Smyd1的细胞系,最后经Western blot及RT-PCR实验鉴定其干扰效果.经鉴定,通过H9c2细胞系构建的pSUPER.retro-Smyd1 干扰细胞系的干扰效果显著.因此,本实验成功构建了 Smyd1干扰真核表达质粒及其稳定转染的H9c2细胞系,为进一步研究Smyd1基因在心脏发育中的作用奠定了良好的实验基础.