人PSCA真核表达质粒的构建及稳定转染B16细胞系的建立

• 作者: 于继云 任杰 江乐 王伟 肖毅 阎瑾琦 高江平
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 前列腺干细胞抗原 稳定转染 肿瘤免疫治疗
• 年，卷（期）: 2010,（10）
• 页码范围: 867-870
• 分类号: R73-3
• 字数: 4043字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2010.10.001

摘要

目的:构建真核表达质粒pcDNA3.1-PSCA,通过稳定转染建立高效表达人前列腺干细胞抗原(PSCA)的小鼠黑色素瘤B16细胞系.方法:利用PCR扩增出人PSCA全长基因的cDNA编码区序列,使用基因重组技术将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1中,得到重组表达质粒pcDNA3.1-PSCA.双酶切及测序鉴定后,利用脂质体法将其转染入小鼠黑色素瘤B16细胞,G418加压筛选后得到阳性克隆.通过流式细胞术、免疫荧光及Western blot检测PSCA在细胞系中的表达情况.结果:经测序及双酶切鉴定,pcDNA3.1-PSCA重组质粒构建正确;稳定转染人PSCA的B16细胞系表达率接近100%.结论:建立的稳定转染人PSCA的B16细胞系能够高效表达PSCA基因,为抗前列腺癌疫苗的功能研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高江平	解放军总医院泌尿外科	130	819	13.0	22.0
2	阎瑾琦	军事医学科学院基础医学研究所	25	54	4.0	5.0
3	于继云	军事医学科学院基础医学研究所	59	145	6.0	9.0
4	王伟	军事医学科学院基础医学研究所	17	65	5.0	7.0
5	任杰	军事医学科学院基础医学研究所	4	24	2.0	4.0
6	江乐	军事医学科学院基础医学研究所	2	4	1.0	2.0
7	肖毅	军事医学科学院基础医学研究所	4	5	1.0	1.0