人DC-SIGN真核表达载体的构建及表达

• 作者: 于继云 余云舟 张亮 张巍 李韧 王宇 贾锐 阎瑾琦 高明
• 来源期刊: 军医进修学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: DC-SIGN 基因表达 293T细胞
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 45-47
• 页数: 3页
• 分类号: R736.8|R73-3
• 字数: 2162字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建含有FLAG标签的人DC-SIGN真核表达载体,并在人胚肾293T细胞中进行表达.方法 通过PCR方法获得含有FLAG标签的人DC-SIGN分子基因,将其插入到真核表达载体pIRES-neo中.构建的重组质粒pIRES-neo-FLAG-DC-SIGN转染293T细胞,利用流式细胞仪、免疫荧光及Western Blot检测其表达情况.结果 含FLAG标签的人DC-SIGN基因测序正确,PCR和酶切鉴定证明FLAG-DC-SIGN基因已成功连入真核表达载体pIRES-neo中;检测结果显示重组质粒pIRES-neo-FLAG-DC-SIGN在293T细胞中得到表达.结论 成功构建了重组质粒pIRES-neo-FLAG-DC-SIGN,且在293T细胞中能有效表达,为后续DC靶向性疫苗研究奠定了基础.