人DC-SIGN绿色荧光融合蛋白真核表达与功能鉴定

• 作者: 徐璐璐 罗永艾 郭述良
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: DC-SIGN 转染 COS7细胞 免疫荧光
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 430-433
• 页数: 4页
• 分类号: R392.11
• 字数: 3022字
• 语种: 中文

摘要

目的:构建人DC-SIGN绿色荧光融合蛋白的真核表达载体,在COS7细胞表面表达鉴定.方法:用RT-PCR从人外周血单个核细胞扩增DC-SIGN蛋白基因片段,连接到T载体.测序鉴定后切下相应片段,连接到pEGFP-C1表达载体,重组质粒(命名为:DS-pEGFP-C1)转染COS7细胞,表达DC-SIGN绿色荧光融合蛋白(命名为:DS-EGFP).荧光定量PCR检测融合基因mRNA拷贝量,激光扫描共焦显微镜鉴定DS-pEGFP-C1的表达和摄取减毒牛型分枝杆菌BCG功能.结果:用RT-PCR扩增得到正确的目的基因片段并构建成真核表达载体DS-pEGFP-C1,转染COS7细胞,荧光定量PCR检测DS-pEGFP-C1转录mRNA拷贝量是4.52×1011 copies/ml,激光扫描共焦显微镜检测证实DS-EGFP在COS7细胞表面表达,同时具有摄取BCG的功能.结论:本研究成功构建人DC-SIGN绿色荧光融合蛋白的真核表达载体DS-pEGFP-C1,表达了融合蛋白,后者能够摄取BCG.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭述良	重庆医科大学附属第一医院呼吸科	140	565	14.0	17.0
2	罗永艾	重庆医科大学附属第一医院呼吸科	178	1476	20.0	30.0
3	徐璐璐	重庆医科大学附属第一医院呼吸科	3	4	2.0	2.0