Grp78基因过表达慢病毒载体构建和包装及鉴定

• 作者: 张庆国 徐世元 李乐 李亚文 李元涛 杨耐梅 苏娇玲 赖露颖 郑艇
• 来源期刊: 重庆医学
• 关键词: Grp78基因 慢病毒载体 基因工程
• 年，卷（期）: 2014,（15）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 1904-1906
• 页数: 3页
• 字数: 4020字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2014.15.028

摘要

目的：探讨Grp78基因过表达慢病毒载体的构建、包装和滴度检测。方法采用慢病毒载体，运用基因工程技术，获取目的基因片段并构建重组质粒，然后制备感受态细胞并转化，将重组质粒导入感受态细胞；用PCR技术鉴定阳性克隆和进行DNA序列分析及对慢病毒包装和滴度检测。结果阳性克隆测序比对结果说明测通。熔解曲线中既没出现杂峰也没出现主峰的异常增宽，表明实验中未出现污染、引物二聚体和非特异性扩增。结论Grp78基因过表达慢病毒载体构建和包装成功。