Beclin1基因慢病毒表达载体的构建和鉴定

• 作者: 乔鹏 伍钢 樊红琨 王书春 王文玉 赵国强
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 慢病毒载体 Beclin1基因 A549细胞 过表达 组织构建
• 年，卷（期）: 2011,（33）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 6177-6181
• 分类号: R318
• 字数: 4817字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2011.33.024

摘要

背景:Beclin1基因是哺乳动物的自噬调控基因.目的:实验拟构建Beclin1 基因慢病毒过表达载体.方法:聚合酶链反应扩增目的基因Beclin1 后插入慢病毒表达载体pLenex中,构建重组载体pLenex-Beclin1.使用聚合酶链反应、双酶切和DNA的测序方法对其进行鉴定,并与辅助包装质粒共感染293T细胞.慢病毒颗粒转染非小细胞肺癌A549细胞后,用蛋白质印迹法检测Beclin1 基因的过表达效率.结果与结论:聚合酶链反应鉴定结果显示扩增的阳性片段已插入pLenex 载体,聚合酶链反应、双酶切和DNA测序结果表明,重组慢病毒载体pLenex-Beclin1 的插入序列完全正确,重组慢病毒载体感染A549细胞后,细胞内Beclin1蛋白高效表达.结果证实,实验成功构建了Beclin1 基因慢病毒过表达载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵国强	郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室	245	807	11.0	16.0
2	伍钢	华中科技大学同济医学院	98	645	13.0	20.0
3	王书春	郑州大学基础医学院生理教研室	32	132	7.0	10.0
4	王文玉	华中科技大学同济医学院附属协和医院肿瘤中心	25	166	8.0	12.0
6	乔鹏	郑州大学基础医学院生理教研室	68	242	8.0	11.0
9	樊红琨	郑州大学基础医学院生理教研室	34	104	5.0	8.0