CXCR4基因慢病毒表达载体的构建、包装及鉴定

• 作者: 张云巍 徐丽娟 潘美妍 王淑芳 胡亚卓 阎丽
• 来源期刊: 局解手术学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 慢病毒载体 CXCR4基因 293T 细胞
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 473-476
• 页数: 4页
• 分类号: Q344+.13
• 字数: 3172字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11659/jjssx.01E015050

摘要

目的：构建CXCR4基因慢病毒过表达载体并对其进行包装、鉴定。方法首先设计合成引物,采用PCR法扩增目的基因CXCR4,将目的基因与酶切线性化的载体进行定向交换,成功构建重组载体慢病毒表达载体pGC-FU-CXCR4,将其产物转化大肠杆菌感受态细胞。对培养出的克隆先进行菌落PCR鉴定,再对PCR鉴定阳性的克隆进行测序和比对分析,最后将获得的病毒载体共同转染293T细胞,收集病毒颗粒,并采用Real time PCR法测定病毒滴度。结果 PCR鉴定结果显示扩增的目的基因已成功插入pGC-FU载体,Western Blot结果显示得到的片段与理论大小相符,阳性克隆测序结果与目的基因序列一致,说明重组慢病毒载体的插入序列完全正确。结论本实验成功构建了CXCR4慢病毒表达载体,并成功对慢病毒进行了包装及病毒滴度测定。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡亚卓	解放军总医院老年医学研究所病理科	39	213	9.0	12.0
2	王淑芳	解放军总医院输血科	25	187	7.0	13.0
3	徐丽娟	解放军总医院南楼临床部消化内科	7	27	2.0	5.0
4	阎丽	解放军总医院南楼临床部消化内科	5	16	2.0	4.0
5	张云巍	解放军总医院南楼临床部消化内科	2	2	1.0	1.0
6	潘美妍		1	0	0.0	0.0