DDIT3调控TNF-α刺激下ATDC5细胞软骨向分化

• 作者: 杨畅 许筱霄 董晓菲 董伟 王家伟
• 来源期刊: 口腔医学研究
• 关键词: DNA损伤诱导转录因子3 肿瘤坏死因子-α ATDC5细胞 软骨向分化
• 年，卷（期）: 2021,（5）
• 所属期刊栏目: 颞下颌关节病学研究
• 页码范围: 448-452
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13701/j.cnki.kqyxyj.2021.05.014

摘要

目的:探究在肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)刺激下,DNA损伤诱导转录因子3(DNA damage inducible transcript 3,DDIT3)对ATDC5细胞软骨向分化的调控.方法:不同浓度TNF-α(0、1、10、20 ng/mL)刺激下诱导ATDC5细胞分化7 d,同时在10 ng/mL TNF-α刺激下诱导慢病毒稳定转染ATDC5细胞分化7 d,qRT-PCR检测炎症相关因子环氧化酶(cyclooxygenase,COX)2、白细胞介素(interleukin,IL)-6、一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)2、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-13的表达,Western blot检测DDIT3、软骨向分化指标Sox9、Col10a1以及p-AKT、AKT蛋白表达情况,阿尔新蓝染色检测细胞外基质形成情况.结果:不同浓度TNF-α刺激下诱导ATDC5细胞分化引起COX2、IL-6、NOS2、MMP-13和DDIT3表达明显升高,Sox9、X型胶原蛋白(collagen type X alpha 1 chain,Col10a1)的表达下降.敲低DDIT3部分逆转了10 ng/mL TNF-α刺激导致的Sox9、Col10a1的表达下降和细胞外基质形成减少,同时促进磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,AKT)蛋白表达.结论:在TNF-α诱导的炎症微环境中,DDIT3调控了ATDC5细胞软骨向分化.