虎杖PcMYB1启动子的克隆及其活性分析

• 作者: 林艳丽 覃建兵 伍翔 王岩岩 潘佑找 柳忠玉
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 虎杖 PcMYB1 启动子 序列分析 GUS活性
• 年，卷（期）: 2021,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 48-55
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2020-1319

摘要

获得药用植物虎杖(Polygonum cuspidatum)PcMYB1启动子,并分析其活性,为进一步研究虎杖转录因子PcMYB1的功能奠定基础.通过hiTAIL-PCR方法,从虎杖叶片基因组DNA中克隆PcMYB1启动子并进行生物信息学分析.分别构建由全长启动子或5'端缺失启动子驱动GUS的重组表达载体P1∷GUS、P2∷GUS、P3∷GUS和P4∷GUS.将重组表达载体转入发根农杆菌中进行虎杖毛状根转化试验,以转化的阳性毛状根为材料,通过GUS组织化学染色分析启动子的活性.成功获得2884 bp的PcMYB1启动子序列(GenBank登录号MT811057).该启动子具有真核生物启动子必需的核心元件TATA-box和CAAT-box,还含有茉莉酸甲酯和低温响应元件以及光响应、厌氧应答等相关的顺式调控元件.重组表达载体经PCR鉴定,证实已构建成功.转化的虎杖毛状根染色之后显蓝色,但同对照相比颜色较浅,说明全长启动子或5'端缺失启动子都具有驱动GUS的活性,但启动活性都比CaMV35S启动子的启动活性弱.PcMYB1的启动子被成功克隆,其具有驱动下游GUS表达的活性.