施马伦贝格病毒N蛋白的原核表达及其单克隆抗体的制备

• 作者: 孔玉方 陈冬杰 魏方 王慧煜 吴绍强
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 关键词: 施马伦贝格病毒 N蛋白 表达 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2021,（8）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 1029-1034
• 页数: 6页
• 分类号: S852.659.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2021.0146

摘要

为了制备针对施马伦贝格病毒(SBV)N蛋白的单克隆抗体,将SBV N基因克隆至原核表达载体pET-28a,构建重组质粒pET28a-SBV-N,转化至BL21(DE3)后进行原核表达并纯化.以纯化的重组SBV-N蛋白免疫BALB/c小鼠制备单克隆抗体(McAbs),最终获得了3株McAbs,依次命名为2D6、4F10和4G8.Ig亚类鉴定结果显示:2D6为IgG2b亚型,轻链为K型;4F10为IgM亚型,轻链为K型;4G8为IgM亚型,轻链为λ型.Western-blot结果显示,这3株McAbs均可与重组SBV-N和赤羽病病毒(AKAV)N蛋白产生特异性反应,进一步表明这些McAbs具有通用性.IFA结果表明,McAb 2D6有望用于SBV与AKAV的血清学鉴别诊断.SBV N蛋白和单克隆抗体的成功制备,为施马伦贝格病血清学诊断提供了生物原料.