MicroRNA-9通过SIRT1/NF-κB通路促进TNF-α诱导心肌细胞损伤的机制研究

• 作者: 张朝华 刘旭帮 朱银川 汤建民
• 来源期刊: 中国循证心血管医学杂志
• 关键词: microRNA-9 心肌细胞 细胞活性 肿瘤坏死因子α
• 年，卷（期）: 2021,（7）
• 所属期刊栏目: 论著|Treatise
• 页码范围: 803-806
• 页数: 4页
• 分类号: R542.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-4055.2021.07.09

摘要

目的 研究microRNA-9(miR-9)表达对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导心肌细胞(H9c2)损伤的影响,并探讨其分子机制.方法 使用CCK8试剂盒检测不同浓度(0、5、10、15和20μg/mL)TNF-α刺激H9c2或TNF-α作用于H9c2不同时间(0、12、24、48和72 h)后心肌细胞活性;向H9c2细胞中转染miR-9抑制剂(miR-9-inhibitor)以敲低miR-9的表达,通过实时荧光定量PCR法检测miR-9的表达,通过免疫印迹法检测SIRT1、p65及p-p65蛋白表达;荧光素酶基因报告系统用于检测miR-9与SIRT1靶向结合情况.结果 TNF-α以剂量和时间依赖性降低心肌细胞活性和促进miR-9在心肌细胞中的表达.与miR-9未敲低组相比,TNF-α刺激后,miR-9敲低组H9c2细胞活性更高(P<0.05).荧光素酶基因报告结果显示:miR-9靶向抑制SIRT1的表达,miR-9敲低可显著促进H9c2细胞中SIRT1蛋白的表达,显著降低p-p65/p65的比例(P均<0.05).结论 miR-9通过抑制SIRT1促进NF-κB通路激活.敲低miR-9可抑制NF-κB通路激活从而减轻TNF-α诱导的心肌细胞损伤,提高心肌细胞活性.