金银花U6启动子的克隆及转录活性分析

• 作者: 唐志强 李小丽 许小涵 蒲高斌
• 来源期刊: 山东科学
• 学科: 医学
• 关键词: 金银花 U6启动子 克隆 基因编辑
• 年，卷（期）: 2022,（2）
• 所属期刊栏目: 中药与天然活性产物|Traditional Chinese Medicine and Natural Active Products
• 页码范围: 11-17
• 页数: 7页
• 分类号: Q78|R28
• 语种: 中文
• DOI: 10.3976/j.issn.1002-4026.2022.02.002

摘要

U6启动子是构建CRISPR/Cas9体系中驱动sgRNA转录的重要元件.利用聚合酶链式反应方法,从华金6号金银花中克隆到3种U6启动子,并分别构建5个不同长度的启动子驱动GUS的植物融合表达载体.以CaMV35S作为阳性对照实验,农杆菌作为阴性对照实验,采用农杆菌瞬时转化法对烟草原生质体进行转染,GUS染色后置于显微镜下观察原生质体的染色数量和效率.根据染色结果,成功筛选出Chr01 U6-F1这一高效转录的启动子,为后期开展金银花的基因编辑奠定了基础.