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广藿香转录因子PcFBA-1的克隆及与FPPS启动子的互作调控分析
广藿香转录因子PcFBA-1的克隆及与FPPS启动子的互作调控分析
作者:
黄慧玲
吴带娣
张丹华
王西林
庄洁旋
詹若挺
陈立凯
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
广藿香
FPPS
转录调控
启动子
蛋白-DNA互作
摘要:
法尼基焦磷酸合酶(farnesyl diphosphate synthase,FPPS)是倍半萜生物合成途径分支点的关键酶,但目前尚未有广藿香FPPS启动子的转录调控研究相关报道.该研究前期挖掘获得广藿香FPPS基因启动子的结合蛋白PcFBA-1,为了探究PcFBA-1参与调控广藿香醇生物合成的可能机制,对PcFBA-1进行PCR克隆和测序分析;采用荧光定量PCR分析PcFBA-1在不同组织的表达模式;通过原生质体转化实验对PcFBA-1进行亚细胞定位分析;通过酵母单杂交系统检测PcFBA-1蛋白与FPPS启动子的结合情况,利用双荧光素酶报告实验验证转录调节功能.结果 表明:克隆的PcFBA-1的开放阅读框(ORF)为1131 bp,编码376个氨基酸,包含F-box-like superfamily和FBA-1 superfamily 2个保守结构域,属于F-box家族蛋白,且PcFBA-1不含信号肽,无跨膜域,属于不稳定亲水性蛋白;此外,荧光定量PCR结果显示PcFBA-1在叶中表达量最高,在根、茎中的表达无显著性差异;PcFBA-1蛋白主要定位于细胞质;酵母单杂交实验和双荧光素酶实验结果表明PcFBA-1在体外和体内均能够结合FPPS启动子,并且增强FPPS启动子的活性.综上,该研究鉴定得到广藿香全新的转录因子PcFBA-1,通过直接结合FPPS基因启动子,增强启动子活性,为广藿香醇等活性成分的生物合成提供科学依据,为广藿香代谢工程和遗传改良提供基础.
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文献信息
篇名
广藿香转录因子PcFBA-1的克隆及与FPPS启动子的互作调控分析
来源期刊
中国中药杂志
学科
关键词
广藿香
FPPS
转录调控
启动子
蛋白-DNA互作
年,卷(期)
2022,(2)
所属期刊栏目
分子生药学
研究方向
页码范围
412-418
页数
7页
分类号
字数
语种
中文
DOI
10.19540/j.cnki.cjcmm.20211026.101
五维指标
传播情况
被引次数趋势
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引文网络
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(0)
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2022(0)
参考文献(0)
二级参考文献(0)
引证文献(0)
二级引证文献(0)
研究主题发展历程
节点文献
广藿香
FPPS
转录调控
启动子
蛋白-DNA互作
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国中药杂志
主办单位:
中国药学会
出版周期:
半月刊
ISSN:
1001-5302
CN:
11-2272/R
开本:
大16开
出版地:
北京市东直门内南小街16号
邮发代号:
2-45
创刊时间:
1955
语种:
chi
出版文献量(篇)
15538
总下载数(次)
36
总被引数(次)
236207
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