摘要:

目的：观察姜黄素(curcumin,Cur)对血管紧张素Ⅱ(AngII)诱导血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖及氧化应激的影响。方法原代培养大鼠 VSMCs细胞,MTT法测定不同浓度Cur 对 AngⅡ诱导 VSMCs 增殖的影响。并分别设对照组、AngⅡ干预组、20μmol/L Cur组及 AngⅡ联用不同浓度Cur(5、10、20μmol/L)组,实时定量 PCR和 Western blot测定各组细胞诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、p47phox mRNA 与蛋白的表达；亚硝酸盐含量重氮化反应吸光测定法(Greiss assay)测定细胞内一氧化氮(NO)的表达；DCFH-DA氧化法测定细胞内活性氧(ROS)含量；黄嘌呤氧化酶法检测各试验组细胞上清液中超氧化物歧化酶(SOD)活性；分光光度计检测谷胱甘肽过氧化物酶(Gpx)活性。采用p47phox特异性 siRNA干扰VSMCs p47phox的表达,并深入探讨Cur抑制AngⅡ诱导的VSMCs增殖及氧化应激的机制。结果 MTT法观察到Cur在0~80μmol/L浓度范围内对细胞活力无显著影响；Cur(5、10、20μmol/L)可以有效抑制 AngⅡ诱导的 VSMCs增殖。同时,Cur可有效抑制 AngⅡ诱导的 NO、iNOS、p47phox、ROS 的高表达并有效提高 SOD和 Gpx的活性,且具有浓度依赖性。采用 p47phox 特异性 siRNA 下调 p47phox 表达,AngⅡ诱导的VSMCs内ROS生成减少。结论 Cur具有抑制AngⅡ诱导VSMCs的增殖及氧化应激作用。这一作用与减少iNOS诱导的 NO合成,下调 p47phox的表达抑制 ROS产生、提高 SOD和 Gpx的活性,进而抑制 AngⅡ诱导的 VSMCs 内氧化应激反应有关。

摘要:

以不同浓度血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导牛乳腺上皮细胞(MAC-T)炎症损伤,探讨血管紧张素转化酶2(ACE 2)的变化及与AngⅡ的相互作用.研究包括:ELISA检测细胞上清中细胞炎性因子的分泌或释放;Westernblot检测细胞ACE 2和ACE的蛋白表达变化,并进行相关性分析;添加ACE 2活性蛋白对AngⅡ诱导损伤的保护作用.结果 显示:1)AngⅡ处理MAC-T,细胞上清中促炎因子TNF-α、IL-6、IL-8含量显著(P＜0.05)或极显著(P＜0.01)增加,抗炎因子IL-10含量显著降低(P＜0.05);2)不同浓度AngⅡ处理细胞后,ACE 2蛋白表达均有降低,10-6 mol· L-1 AngⅡ处理后显著降低(P＜0.05);ACE蛋白表达结果相反;ACE 2与AngⅡ浓度之间存在显著负相关;3)添加外源性ACE 2活性蛋白,细胞上清中TNF-α、IL-6和IL-8浓度均有一定程度的下降,IL-10浓度升高.本研究表明ACE 2/ACE轴的失衡是AngⅡ诱导细胞炎性损伤的主要原因.高水平AngⅡ可激活炎症因子促进炎症反应,是促进炎症反应的主要介质,ACE 2可以通过降解AngⅡ,抑制其对炎症反应的上调效应.

摘要:

目的 在原代培养的新生大鼠心肌细胞上,观察丹参酮ⅡA(TSN)对血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导的心肌细胞肥大的影响.方法 应用细胞培养技术培养新生大鼠心肌细胞,采用相差显微镜测量细胞大小,测定心肌细胞3H-亮氨酸掺入作为心肌细胞肥大的指标;用流式细胞仪测定心肌细胞凋亡率,用Western blot法检测心肌细胞凋亡蛋白P53、Bax和Bcl-2的表达.结果 TSN能抑制AngⅡ诱导的心肌细胞增大、心肌细胞3H-亮氨酸掺入率的显著增加(P＜0.01)、心肌细胞凋亡率的增加(P＜0.05)、心肌细胞促凋亡蛋白P53和Bax表达的明显增高(P＜0.01),其效果与AngⅡ受体阻滞剂缬沙坦(Valsartan)相似.结论 TSN可以抑制Ang Ⅱ诱导的心肌细胞肥大,这可能与其同时抑制了心肌细胞的凋亡有关.

摘要:

目的 研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心脏重构的机制和筛选潜在治疗靶点.方法 大鼠心脏成纤维细胞(CFSs)加入10 nM AngⅡ后培养12h,对照组未加入AngⅡ.从2组样品中提取RNA后,检测细胞基因表达水平.使用R语言中的limma软件包筛选两组样本间的差异表达基因(DEGs),并通过富集分析探讨它们的功能和参与的信号通路.此外,通过蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络构建揭示它们在蛋白水平的关系.结果 共筛选了126个上调基因和140个下调差异表达基因.根据富集分析发现:其中的ACACB,IL1B,IL1A,NOS2和MMP3与免疫反应、血管生成的调控、超氧代谢过程和羧酸结合生物过程高度相关.PPI网络构建显示:ACACB和MPP3是两个主要节点.结论 ACACB,IL1B,IL1A,NOS2和MMP3这五种基因,可能是AngⅡ诱导心脏重构的重要候选标志物.

摘要:

目的评估替米沙坦联合小剂量氢氯噻嗪(研究组)治疗轻中度高血压疗效和安全性.方法以卡托普利联合小剂量氢氯噻嗪为对照组,在轻中度高血压患者中进行随机、平行、活性对照的临床研究.结果研究组患者治疗4周后总有效率为88.6%,对照组患者治疗4周后总有效率为76.1%.两组不良反应发生率分别为9.09%和11.9%,主要是面红、头晕、干咳,双下肢轻度浮肿.心率(HR)、血生化、肝肾功能无明显变化.结论替米沙坦降压疗效好,耐受性良好,不良反应少,可作为治疗轻中度高血压的一线方案.

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目的 探讨富含脯氨酸蛋白酪氨酸激酶(Pyk2)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导大鼠心肌细胞肥大的作用及其机制.方法 提取大鼠乳鼠原代心肌细胞,随机分为对照组、AngⅡ诱导组(AngⅡ剂量为100 nmol/L,将其加入心肌细胞培养皿中刺激24 h)、Pyk2抑制剂PF-431396组(PF-431396剂量为10μmol/L,在AngⅡ刺激前30 min加入心肌细胞培养皿中)以及PF-431396干预AngⅡ诱导组(AngⅡ剂量为100 nmol/L,PF-431396剂量为10μmol/L).用细胞骨架蛋白(α-actinin)免疫荧光染色检测心肌细胞表面积大小;real-time PCR检测心肌细胞中肥大指标(ANP和β-MHC)mRNA表达;Western blot检测心肌细胞p-Pyk2、Pyk2以及p53的蛋白表达.结果 在AngⅡ刺激下,心肌细胞表面积增大(P<0.05)、肥大指标的mRNA水平升高(P<0.05)、p-Pyk2和p53的蛋白水平增加(P<0.05);而加入Pyk2抑制剂PF-431396后,心肌肥大指标明显改善,p-Pyk2和p53的蛋白表达降低(P<0.05).结论 Pyk2通过p53信号通路促进AngⅡ诱导的大鼠心肌细胞肥大.

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目的：观察姜黄素(curcumin,Cur)对血管紧张素Ⅱ(AngII)诱导血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖及氧化应激的影响。方法原代培养大鼠 VSMCs细胞,MTT法测定不同浓度Cur 对 AngⅡ诱导 VSMCs 增殖的影响。并分别设对照组、AngⅡ干预组、20μmol/L Cur组及 AngⅡ联用不同浓度Cur(5、10、20μmol/L)组,实时定量 PCR和 Western blot测定各组细胞诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、p47phox mRNA 与蛋白的表达；亚硝酸盐含量重氮化反应吸光测定法(Greiss assay)测定细胞内一氧化氮(NO)的表达；DCFH-DA氧化法测定细胞内活性氧(ROS)含量；黄嘌呤氧化酶法检测各试验组细胞上清液中超氧化物歧化酶(SOD)活性；分光光度计检测谷胱甘肽过氧化物酶(Gpx)活性。采用p47phox特异性 siRNA干扰VSMCs p47phox的表达,并深入探讨Cur抑制AngⅡ诱导的VSMCs增殖及氧化应激的机制。结果 MTT法观察到Cur在0~80μmol/L浓度范围内对细胞活力无显著影响；Cur(5、10、20μmol/L)可以有效抑制 AngⅡ诱导的 VSMCs增殖。同时,Cur可有效抑制 AngⅡ诱导的 NO、iNOS、p47phox、ROS 的高表达并有效提高 SOD和 Gpx的活性,且具有浓度依赖性。采用 p47phox 特异性 siRNA 下调 p47phox 表达,AngⅡ诱导的VSMCs内ROS生成减少。结论 Cur具有抑制AngⅡ诱导VSMCs的增殖及氧化应激作用。这一作用与减少iNOS诱导的 NO合成,下调 p47phox的表达抑制 ROS产生、提高 SOD和 Gpx的活性,进而抑制 AngⅡ诱导的 VSMCs 内氧化应激反应有关。

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目的 探讨二苯乙烯苷对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导人脐静脉内皮细胞衰老的保护作用.方法 体外培养人脐静脉内皮细胞后,AngⅡ诱导细胞衰老模型,MTS法检测细胞存活率,SA-β-gal染色分析细胞衰老程度,qPCR检测miR-34a mRNA表达,Western blot检测p53、PAI-1、SIRT1、E2F1蛋白表达.结果 二苯乙烯苷干预后,细胞存活率、SIRT1蛋白表达显著升高(P＜0.05),β-gal阳性率及p53、PAI-1蛋白表达显著降低(P＜0.05).同时,该成分对miR-34a、E2F1表达也有明显抑制作用(P＜0.05).结论 二苯乙烯苷对AngⅡ诱导人脐静脉内皮细胞衰老具有明显保护作用,其作用机制可能与抑制miR-34a、E2F1表达及促进SIRT1蛋白表达有关.

摘要:

目的 观察苁归益肾胶囊(肉苁蓉、当归、山茱萸、桂枝、泽泻、丹皮)对糖尿病肾病模型大鼠的治疗作用.方法 120只SD大鼠随机分为6组,苁归益肾胶囊高、中、低剂量组,厄贝沙坦阳性对照组,模型组和正常组,每组20只.采用STZ腹腔注射建立糖尿病肾病大鼠模型.分组造模后灌胃给药4周,检测空腹血糖、24 h尿微蛋白量、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、肾组织血管紧张素Ⅱ受体1(AT1R)、血管紧张素Ⅱ受体结合蛋白(AGTRAP)、结缔组织生长因子(CTGF)的表达等指标.结果 经苁归益肾胶囊治疗4周后,大鼠24h尿蛋白、空腹血糖及AngⅡ的水平均明显低于模型组(P＜0.05).结论 苁归益肾胶囊对糖尿病肾病模型大鼠有一定的治疗作用,其可能机制是抑制了大鼠的炎症反应,与抑制大鼠肾组织中AT1R、AGTRAP、CTGF的表达,降低AngⅡ的水平有关.

摘要:

目的 探讨五味子乙素对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导心肌纤维化中AkT、mTOR、TGF-β1表达的影响.方法 胶原酶与差速贴壁法分离培养乳鼠心肌成纤维细胞后,将细胞随机分为对照组、AngⅡ组、AngⅡ+五味子乙素低剂量组(2.5×10-5 mol/L)、AngⅡ+五味子乙素高剂量组(7.5×10-5 mol/L)、AngⅡ+雷帕霉素组.然后,Western blot检测蛋白激酶B(AkT)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、转化生长因子-β1 (TGF-β1)、Ⅰ型胶原蛋白(Collagen Ⅰ)蛋白表达.结果 与对照组比较,AngⅡ显著刺激心肌成纤维细胞下调p-AkT蛋白表达,上调p-mTOR、TGF-β1、Collagen Ⅰ蛋白表达(P＜0.05);与AngⅡ组比较,AngⅡ+五味子乙素组显著下调p-mTOR、TGF-β1、Collagen Ⅰ蛋白表达,上调p-AkT蛋白表达(P＜0.05).结论 五味子乙素可通过促进AkT磷酸化,抑制p-mTOR、TGF-β1蛋白表达,减少Collagen Ⅰ合成来改善AngⅡ诱导心肌纤维化.