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1.【期刊】固定化基因工程菌的培养和hEGF表达

作者：岑沛霖徐志南沈文和陈新爱

刊名：化工学报

发表时间：2003-07-01

摘要:

聚氨酯泡沫 hEGF重组菌固定化培养质粒稳定性

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2.【期刊】双基因共表达载体的诱导表达优化及质粒稳定性

作者：张洪江捍平

刊名：中国现代医学杂志

发表时间：2006-04-01

摘要:

考察IPTG及乳糖对含pTrx-AEP的BL21(DE3)诱导情况,SDS-PAGE分析两种蛋白的表达情况并结合菌浓变化,探讨乳糖替代IPTG的可行性,并在有选择性压力情况下传代,考察pTrx-AEP质粒稳定性,质粒突变率维持在一个极低的水平,传代对蛋白表达的影响不显著.

诱导 IPTG 乳糖质粒稳定性

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被引 2

3.【期刊】羟酸还原异构酶基因多拷贝重组酵母的构建

作者：李艳铁翠娟何秀萍张博润诸葛健

刊名：食品与发酵工业

发表时间：2003-01-01

摘要:

利用PCR技术扩增出啤酒工业酵母QY的羟酸还原异构酶基因ILV5,在酵母YS58中表达时,羟酸还原异构酶活力提高2～3倍.将ILV5基因与铜抗性基因插入到YEp352载体中得到重组质粒pLZ-5C,转化QY,通过铜抗性筛选转化子,所得转化子的羟酸还原异构酶的活力明显高于对照菌株QY,在发酵测试中,转化子产生双乙酰的量比原始菌株降低了60%.

啤酒工业酵母羟酸还原异构酶 ILV5 质粒稳定性双乙酰

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被引 5

4.【期刊】质粒pMC73A在宿主细菌中的稳定性研究

作者：邱晓颖朱红惠卢秋雁丘元盛

刊名：高技术通讯

发表时间：1998-06-01

摘要:

针对基因工程菌在农业生产应用上的安全性问题,对质粒pMC73A在宿主细菌NG13中的稳定性进行了研究.试验结果表明:质粒pMC73A在宿主细菌中是不稳定的.在宿主细菌连续繁殖过程中,质粒pMC73A随宿主细菌的繁殖而发生缺失,当宿主细菌繁殖70代时,质粒pMC73A的缺失超过50%;宿主细菌繁殖约120代,质粒pMC73A的缺失几乎达到100%.

耐氨固氮菌 nifA基因质粒稳定性

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被引 30

5.【期刊】基于Ⅱ型毒素-抗毒素系统构建ε-聚赖氨酸合成酶的链霉菌稳定表达载体

作者：周奕阳李鹏谭之磊邓子新贾士儒欧竑宇

刊名：湖南农业大学学报（自然科学版）

发表时间：2019-02-01

摘要:

鉴于 ε-聚赖氨酸发酵过程对抗生素压力条件的依赖,尝试基于Ⅱ型毒素-抗毒素系统(relBE2sca)构建无选择压力下稳定表达 ε-聚赖氨酸的淀粉酶产色链霉菌表达系统:将抗毒素基因relB2sca与 ε-聚赖氨酸合成酶基因pls克隆至表达载体,并导入淀粉酶产色链霉菌pls缺失突变株,将毒素基因relE2sca整合至淀粉酶产色链霉菌的染色体(突变株YY3),获得包含 ε-聚赖氨酸稳定表达的突变株YY1.经过多次传代,相比对照组,在不含抗生素压力条件下,突变株YY1依然能够稳定地合成 ε-聚赖氨酸.毒素蛋白RelE2sca的表达会导致变铅青链霉菌、阿维链霉菌和链霉菌FR-008等常用链霉菌异源表达宿主的死亡,提示基于Ⅱ型毒素-抗毒素系统(relBE2sca)可作为一种通用的遗传标记.

链霉菌表达载体 Ⅱ型毒素-抗毒素系统 ε-聚赖氨酸合成酶质粒稳定性

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被引 0

6.【期刊】重组质粒pMG36e-nisI-gfp在乳酸菌中的应用

作者：代伟丽王艳萍王菁蕊白小佳

刊名：天津科技大学学报

发表时间：2012-03-01

摘要:

本研究将带有nisI和gfp(绿色荧光蛋白)基因的乳酸菌表达栽体pMG36e-nisI-gfp转化至乳酸菌中,观察其在宿主内的稳定性.对重组菌进行了菌体形态、传代培养、质粒验证等研究,考察了该质粒的稳定性.结果显示:重组菌在不含抗生素的培养基中连续传代20代后,质粒丢失率低；菌体大小和形态基本不变；质粒经HindⅢ酶切后大小不变；GFP在第0、5、10、15和20代宿主菌中都可以表达,表达量没有明显差别,在SDS-PAGE中的带型一致；初步的动物实验验证了该质粒作为遗传标记的应用效果.说明该质粒在宿主菌中具有良好的稳定性.

绿色荧光蛋白乳酸菌质粒稳定性

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被引 4

7.【期刊】hok/sok-parDE增强鼠伤寒沙门菌菌毛编码质粒稳定性研究

作者：杨维红陈杨张成栋孙国忠凌洁玉涂玲玲陈焕春郭爱珍

刊名：动物医学进展

发表时间：2007-09-01

摘要:

将编码两个质粒稳定系统的融合基因克隆至表达鼠沙门菌Ⅰ型菌毛(fim)基因的质粒pAZ44中,获得pAZ44-h.将两质粒分别转化鼠伤寒沙门菌,连续培养144 h,每隔12 h转接1代,并取样,用抗性平板计数细菌,通过抗性检测质粒存在状况.结果发现,质粒pAZ44在细菌培养12 h～24 h后开始丢失,而含稳定系统的质粒pAZ44-h在连续培养10代或120 h都未发生丢失.表明aphA-hok-parDE序列显著增强了质粒的稳定性,为进一步研究鼠沙门菌Ⅰ型菌毛的功能奠定了基础.

质粒稳定性 hok/sok parDE 沙门菌

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被引 3

8.【期刊】利用RK2的parDE片段提高重组质粒在生防菌成团泛菌中的稳定性

作者：赵立平张丽李艳琴申泉肖虹

刊名：中国生物防治

发表时间：1999-02-01

摘要:

用PCR方法将广宿主范围质粒RK2中控制稳定性的片段parDE克隆到pGEM-T载体上,然后插入到分泌表达载体pExSec1的BamHI切点上,得到两个新载体pZL2和pZL3,其中parDE的转录方向分别与T7启动子相同和相反.经酶切物理图谱分析和PCR扩增验证后,将pZL2 和pZL3分别电击转化到成团泛菌308R中,在无抗生素的LB培养基中生长100代后仍100%地保留在细胞内.新质粒在植物叶面生长的细胞内也100%稳定.

成团泛菌质粒稳定性 RK2 parDE

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被引 13

9.【期刊】重组人内皮抑素工程菌菌种稳定性考察

作者：陈罗胜殷润婷徐寒梅奚涛

刊名：生物加工过程

发表时间：2008-06-01

摘要:

研究重组人内皮抑素突变体质粒HM-E的宿主菌E.coliBL21(DE3)在LB培养基中传代50代过程中菌种的稳定性.研究表明,重组人内皮抑素工程菌在传代50代的过程中质粒稳定性(ST)高,为98%,菌体与菌落呈典型的大肠杆菌形态,反复冻融后表达量未下降,目标蛋白在菌体超声的沉淀中质量分数为(58.75±3.78)%,同时,四甲基偶氮唑盐微量反应比色法(MTT)结果表明目的蛋白质量浓度为20 μg/mL时对内皮细胞ECV-304具有很高的抑制率,达(94.72±2.10)%.

工程菌质粒稳定性重组人内皮抑素菌种传代

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被引 3

10.【期刊】产普鲁兰酶重组大肠杆菌质粒稳定性的研究

作者：翟成一徐岩聂尧穆晓清

刊名：工业微生物

发表时间：2015-02-01

摘要:

通过对产普鲁兰酶的重组大肠杆菌E． coli BL21（DE3）／pET28a-s-pul菌株在发酵过程中质粒稳定性和普鲁兰酶生成量的考察，发现不同宿主对质粒稳定性及酶活性有重要影响。本文利用E． coli BL21（DE3）pLysS菌株为宿主，构建重组菌E． coli BL21（DE3）pLysS／pET28a-s-pul，通过控制外源蛋白的本底表达，提高了重组菌株的质粒稳定性。优化发酵培养基和发酵条件以后，重组菌产普鲁兰酶能力由480 U／mL提高至627 U／mL，增幅为30．6％。研究结果认为，严格控制外源蛋白的本底表达，是改善重组菌稳定性的重要方法之一。

普鲁兰酶大肠杆菌质粒稳定性本底表达发酵优化

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被引 7

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