人免疫缺陷病毒1(HIV-1)膜蛋白基因片段在酵母中的克隆表达

• 作者: 刘巍峰 岑山 曾毅 滕智平 王祖农 高东
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人免疫缺陷病毒 基因,ENV 基因表达 癌基因蛋白质类,融合
• 年，卷（期）: 1999,（1）
• 所属期刊栏目: 病毒学
• 页码范围: 13-16
• 分类号: R3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.1999.01.004

摘要

目的 为获得足够量的膜糖蛋白,以便于对不同HIV分离株膜糖蛋白的结构与功能进行进一步的研究.方法 从人免疫缺陷病毒1(HIV-1)HXB2分离株原病毒基因组的重组质粒pHXB2中克隆了两段膜糖蛋白基因(ENV)片段.以酵母穿梭诱导表达质粒pYES2为载体,构建了两个相应的重组表达质粒pYENV1和pYENV2;进一步利用大肠杆菌β-半乳糖苷酶基因(β-lacZ)构建了HIV-1膜外糖蛋白DNA片段与β-lacZ基因的融合表达质粒.将此3种质粒分别转化单细胞真核生物酿酒酵母BJ1991,得到的转化子经半乳糖诱导表达后进行菌体全蛋白的SDS-PAGE分析.结果 克隆的基因片段在酿酒酵母中产生了分子质量为50×103的特异性诱导蛋白;对含此融合表达质粒的酵母转化子半乳糖诱导后表达产物的免疫检测表明,与对照菌株相比,融合表达产物具有和HIV-1阳性血清抗体反应的抗原性.结论 可通过β-半乳糖苷酶活性的测定直接指示抗原片段的表达;为表达的膜糖蛋白片段的进一步分离纯化打下了一定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	滕智平	中国预防医学科学院病毒所	2	2	1.0	1.0
2	曾毅	中国预防医学科学院病毒所	43	368	12.0	17.0
3	岑山	中国预防医学科学院病毒所	1	1	1.0	1.0