人Prp8蛋白基因片段的克隆

• 作者: 史雪彬 姚智 杨洁 步天栩 洪敬欣 邵洁
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 抗体,单克隆 基因表达 遗传载体 质粒 真核细胞 逆转录聚合酶链反应 人类
• 年，卷（期）: 2007,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 801-803,后插1
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-9896.2007.11.001

摘要

目的:构建人Prp8基因全长真核表达质粒.方法:从HeLa细胞中提取总体RNA,两步法合成cDNA,利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法,扩增出人Prp8基因的四段序列,首先克隆至pTZ57R/T载体,再定向克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+),构建pcDNA3.1(+)-Prp8重组质粒.结果:RT-PCR法获得Prp8基因的4段序列,长度分别为2025、1 090、1 966、1 963 bp,分别与pTZ57R仃载体连接后,选择合适的酶切位点再连接成全长序列,然后将全长序列和pcDNA3.1(+)真核表达载体连接、转化、酶切鉴定及序列分析后,证实pcDNA3.1(+)-Prp8重组质粒构建成功.结论:成功克隆了人Prp8的编码基因,并构建了表达载体pcDNA3.1(+)-Prp8.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姚智	天津医科大学免疫学教研室	137	1428	20.0	33.0
2	杨洁	天津医科大学免疫学教研室	56	151	7.0	10.0
3	步天栩	天津医科大学免疫学教研室	15	56	5.0	6.0
4	邵洁	天津医科大学免疫学教研室	6	12	2.0	3.0
5	洪敬欣	天津医科大学免疫学教研室	4	4	1.0	1.0
6	史雪彬	天津医科大学免疫学教研室	6	4	1.0	1.0