逆转录病毒介导重组CD23 cDNA 稳定整合的RVc23-8866细胞株的建立

• 作者: 刘芳 唐莉 宋辉 徐德胜 晋康新 王卫莉
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 逆转录病毒 B淋巴细胞 CD23 RVc23-8866
• 年，卷（期）: 1999,（9）
• 所属期刊栏目: 分子与细胞免疫学
• 页码范围: 388-390
• 页数: 3页
• 分类号: R392.12
• 字数: 1951字
• 语种: 中文

摘要

目的:建立稳定整合的细胞株,为研究外源基因定位整合机制及其对靶细胞生物特征影响,建立一个生物模型.方法:构建重组病毒载体PLXCD;用Lipofectin将PLXCD转染PA317包装细胞,用G418筛选获得抗性细胞克隆,扩增抗性细胞收集病毒上清;测定病毒上清效价,感染RPMI8866细胞,用G418筛选获得抗性细胞(RVc23-8866细胞);用FACS分析RVc23-8866细胞膜蛋白分子CD23的表达;用细胞原位杂交(FISH)分析细胞染色体基因组的改变.结果:建立了稳定整合的RVc23-8866细胞株.结论:FISH结果表明PLXCD重组体已整合到细胞基因组中;FACS分析表明RVc23-8866细胞膜表面CD23分子的表达量明显降低,并说明了整合入基因组的CD23片段影响了固有CD23基因的表达.