小鼠PKD1基因的克隆及打靶载体的构建

• 作者: 梅长林 胡以平 郁胜强
• 来源期刊: 第二军医大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 基因 PKD1 基因克隆 载体构建
• 年，卷（期）: 1999,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 346-349
• 分类号: Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0258-879X.1999.06.002

摘要

目的:克隆小鼠的多囊肾病1(PKD1)基因,构建PKD1基因的Knockout载体,为产生PKD1基因缺陷小鼠品系准备条件.方法:以正常小鼠基因组DNA为模板,扩增小鼠PKD1基因部分序列为探针,应用噬斑原位杂交技术筛选129SvTer小鼠基因组DNA文库,并应用Southern杂交、亚克隆及测序等方法鉴定所得克隆.对克隆到的PKD1基因组DNA片段进行结构分析,选择合适的亚克隆片段,以pTK-NEO质粒为框架构建目标载体.结果:筛选得到1个阳性克隆,证实了所得序列与基因库收录的序列一致,并成功构建了符合设计要求的目标载体.结论:克隆到含有PKD1基因目的区域的基因组DNA片段以及目标载体的成功构建,为建立小鼠PKD1胚胎干细胞基因打靶动物模型奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	梅长林	第二军医大学长征医院肾内科	236	1589	20.0	27.0
2	胡以平	第二军医大学基础医学部细胞生物学教研室	102	550	11.0	19.0
3	郁胜强	第二军医大学长征医院肾内科	27	68	5.0	7.0