人TNFβ缺失体融合表达及其产物一步纯化法研究

• 作者: 丁仁瑞 余建法 华明 周晴 徐建芬 沈炳辉 马志章
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 医学
• 关键词: 人β-肿瘤坏死因子 T7lac启动子 TNFβ融合表达 复性 pET-28表达 载体 Ni2+亲和层析
• 年，卷（期）: 2000,（1）
• 页码范围: 1-5
• 页数: 5页
• 分类号: R9
• 字数: 2557字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8915.2000.01.001

摘要

本文将h TNFβN端缺失23aa的缺失体基因克隆于pET-28-C(+)表达载体,构建成T7lac启动子控制下His6-TNFβ融合表达质粒,转化到E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达,His6-TNFβ表达量约占总菌体蛋白的25%,Mr 20500.表达产物大部分以包涵体形式存在.包涵体经过洗涤,70mol/L脲变性溶解,用Ni2+亲和层析一步快速纯化,所得His6-TNFβ的纯度达90%以上,回收率在90%左右.纯化产物稀释复性后,其细胞毒活性为(0.5～1.0)×106U/mg 蛋白左右.这些研究结果将为制备重组人TNFβ缺失体以及进一步研究其生物学功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	华明	浙江大学生命科学学院免疫工程实验室	2	24	2.0	2.0
2	余建法		11	41	3.0	6.0
3	徐建芬	浙江大学生命科学学院免疫工程实验室	7	35	3.0	5.0
4	马志章	浙江大学生命科学学院免疫工程实验室	6	23	3.0	4.0
5	周晴	浙江大学生命科学学院免疫工程实验室	4	11	2.0	3.0
6	丁仁瑞	浙江大学生命科学学院免疫工程实验室	5	87	2.0	5.0