猪卵透明带-3α蛋白在大肠杆菌中表达的研究

• 作者: 倪晓华 刘建平 徐万祥 牟忠明 申庆祥 谢毅 贾小明 邱德义 顾少华
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 猪ZP3αcDNA 大肠杆菌 基因表达
• 年，卷（期）: 2000,（6）
• 所属期刊栏目: 生殖免疫学
• 页码范围: 303-306
• 页数: 4页
• 分类号: R392.11
• 字数: 3128字
• 语种: 中文

摘要

目的:通过原核表达系统获得研制ZP疫苗的靶抗原.方法:用PCR方法删除猪卵透明带-3α(pZP3α)cDNA 5'端非编码区碱基顺序.在扩增的该基因5'端小片段与双酶切3'端大片段在ApaI 位点相连后,通过双酶切位点将读框完整的目的基因定向插入pBV221表达质粒PRPL启动子下游的多克隆区.结果: 此重组表达质粒转化宿主菌后经热诱导培养,可在SDS-PAGE胶上观察到61 kD的特异蛋白表达条带,而且它在Western blot 鉴定实验中能被抗pZP IgGs识别.结论:非糖基化天然pZP3α蛋白的可获得性将有助于研制和评价基于pZP3α蛋白的避孕疫苗.