重组β-半乳糖苷酶腺病毒载体的构建及其在血管平滑肌细胞中的表达

• 作者: 张群林 李瑞明 王俊峰 王卫民 王家宁 葛永贵 黄永章
• 来源期刊: 郧阳医学院学报
• 学科: 生物学
• 关键词: β-半乳糖苷酶类 腺病毒 肌,平滑,血管 载体
• 年，卷（期）: 2000,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 193-196
• 页数: 4页
• 分类号: Q782
• 字数: 2732字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-9674.2000.04.001

摘要

目的：构建表达β-半乳糖苷酶(β-gal)的重组腺病毒，以期为再狭窄的基因治疗研究提供一个对照载 体和为腺病毒介导的基因转移的安全性、可行性、转染效率的研究提供一有用的工具。方法：采用基因重组方法构 建穿梭质粒pAd-β-gal,通过同源重组法制备出重组腺病毒Ad-β-gal,转染的293细胞用X-gal染色鉴定Ad-β -gal的正确与否。通过测定260 nm的紫外光吸收值估计病毒高度。原代大鼠血管平滑肌细胞采用组织块培养 法。Ad-β-gal以100 moi感染VSMCs并行X-gal染色，以观察β-gal在VSMCs中的表达情况。结果：成功构建了 pAd-β-gal穿梭质粒和Ad-β-gal重组腺病毒，转染的293细胞和VSMCs经X-gal染为蓝色，病毒浓度为9×l011 pfu/ml,以100 moi Ad-β-gal转染VSMCs,其转染效率接近l00%。结论：表达β-gal的重组腺病毒构建成功，并在 VSMCs中得到有效表达，本研究为将来再狭窄基因治疗研究提供了一对照载体，也为腺病毒介导的基因转移的安 全性、可行性、有效性的研究提供了一有用的工具。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王俊峰	郧阳医学院附属太和医院心内科	24	79	5.0	7.0
2	王家宁	郧阳医学院分子生物学实验室	119	709	13.0	20.0
6	黄永章	郧阳医学院分子生物学实验室	66	379	11.0	16.0
7	王卫民	郧阳医学院分子生物学实验室	35	136	7.0	10.0
8	张群林	郧阳医学院附属太和医院心内科	37	129	6.0	9.0
9	葛永贵	郧阳医学院附属太和医院心内科	8	34	3.0	5.0
10	李瑞明	郧阳医学院分子生物学实验室	13	48	4.0	6.0