CH50真核表达载体pCH503的构建及小鼠体内表达的趋化与抗肿瘤活行

• 作者: 冯作化 张慧 张桂梅 李东 黄波
• 来源期刊: 中国生物化学与分子生物学报
• 学科: 医学
• 关键词: 纤维粘连蛋白 重组多肽 趋化 肿瘤
• 年，卷（期）: 2000,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 769-773
• 页数: 5页
• 分类号: Q512.2|R329.2+5|R273
• 字数: 4384字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7626.2000.06.014

摘要

构建重组FN多肽CH50真核表达载体并在小鼠体内表达,研究其趋化与抗肿瘤作用.采用重组DNA技术构建表达质粒;体内进行基因转染,采用RT-PCR鉴定导入基因的表达;通过肝素亲和层析、SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产物;腹腔细胞计数、Giemsa染色分析以及肌肉组织切片与染色观察体内基因转染后的趋化作用;小鼠黑色素瘤模型研究基因转染抑制肿瘤的作用.从CH50原核表达载体获得重组多肽的cDNA,5＇端加上小鼠IFN-γ5＇端非编码区和信号肽编码区的cDNA,3＇端加上人FN cDNA的3＇端非编码区;将重组cDNA插入pREP8质粒,即构建出pCH503质粒.巨噬细胞在体内经pCH503转染,然后在体外培养,能够产生CH50多肽.以pCH503分别进行腹腔基因转染和肌肉内基因转染,均可对免疫细胞产生趋化作用;pCH503体内转染可以使小鼠腹腔内黑色素肿瘤结节数降低50%～601.CH50真核表达载体pCH503可在小鼠体内表达,体内基因转染可趋化免疫细胞和抑制肿瘤结节形成,在肿瘤综合治疗中有重要意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李东	同济医科大学医学分子生物学研究室	5	4	1.0	2.0
2	黄波	同济医科大学医学分子生物学研究室	1	0	0.0	0.0
3	冯作化	同济医科大学医学分子生物学研究室	4	5	1.0	2.0
4	张桂梅	同济医科大学医学分子生物学研究室	5	6	1.0	2.0
5	张慧	同济医科大学医学分子生物学研究室	3	5	1.0	2.0